5株类鼻疽伯克霍尔德菌fur基因检测报告.pdfVIP

传染病信息 2011年2月28日 第 24卷 第 1期 InfectDisInfo，Vo1．24，No．1，February28，2011 ·23 · 5株类鼻疽伯克霍尔德菌 r基因检测报告 杨小敏，I张守印l，陈 海 [摘要】 目的 检测 基因序列，探讨类鼻疽伯克霍尔德菌的毒力相关因素。方法 对 5株类鼻疽伯克霍尔德菌标本进 行培养和鉴定，使用PCR法扩增类鼻疽伯克霍尔德菌mr基因序列，测序结果与 GenBank中类鼻疽伯克霍尔德菌基因组的序 列进行Blast比对。结果 依据形态及生化特征，5株均被确认为类鼻疽伯克霍尔德菌。PCR法扩增 ^盯基因片段后 ，经测序， 其序列与GenBank中类鼻疽伯克霍尔德菌基因组的 基因序列同源性为99％。结论 来源于海南不同县市的5株类鼻疽 伯克霍尔德菌均含有致病力的 基因。 关【键词】类鼻疽；败血症 ；基因；遗传载体 中【国图书资料分类号】R754．3 文【献标志码】A 文【章编号】1007—8134(2011)01-0023—03 Identificationoffurgenefrom5strainsofBurkholderiapseudomallei YANGXiao～min，匡 圈 ，CHENHai AffiliatedHospitalofHMnanMedical Couege，Haikou，Hainan570102，China A【bstract】 Objective TodetectfurgenesequencefromBurkholderiapseudomaUeiandtoinvestigatethevirulencefactorsof 丑 pseudomallei．M ethods Fivestrainsof且 pseudomalleiwereculturedandidentified．Furgenesequencesof hte5strainswere amplifiedusingPCR assay．andthenwerecomparedwiht htoseof最 pseudomalleigenomeinGenBnakusingBlast．Results Ac- cordingtohteshapenadbiochemicalchraacteristics．hte5strainswereidentifiedas置pseudomallei．Afterfurgeneswereamplified usingPCR andsequenced，hteresu]tshowedhte rgenesequencesofhte5strainshada99％ homologywiⅡlhtesequencesofB． pseudomaUeigenome rgeneinGenBank．Conclusion Pahtogenicfurgeneisidentifiedin5strainsofpseudomaUeiisolated from htepatientsfrom differentcountiesorcitiesofHainanProvince． K【eywords] melioidosis；septicemia；genes；geneticvectors 类鼻疽是一种流行于热带和亚热带地区的环 金生物技术有限公司。 境性疾病 ，临床上表现复杂 ，素有 “百样病”之称。 1．4 分子鉴定操作程序 ①模板制备。细菌培养 ： 急性败血症患者常伴多处化脓性损害，慢性患者有 血标本 10IIll接种于血培养瓶，阳性报警传种于血 类似空洞型肺结核的表现 。病情严重者 ，如不及 琼脂平板，35℃培养24h。水煮模板 ：取一根无菌 时治疗 ，病死率甚高。类鼻疽伯克霍尔德菌是人 的1．5Ⅱd离心管 ，加入蒸馏水 200 l，用接种环从 类和动物的高致病性微生物 ，被视为潜在的生物恐 琼脂平板菌落上刮取细菌置于离心管中，盖住管 怖相关细菌。因此，明确、快速地检测和识别这类 盖 ，100℃水浴 10min，10000r／min离心 10min， 危险病原体至关重