原发性肾小球疾病患者肾小球足细胞数和.pdfVIP

·55· ·短篇论著· 原发性肾小球疾病患者肾小球足细胞数与 尿中足细胞数的相关性 王慧 张艳辉 李增艳杜宇 南蕾 王彩丽 肾小球疾病(GN)是由多种病因和发病机制引起的一 (2)尿沉渣涂片足细胞特异蛋白抗体(PCX)免疫荧光染色 组疾病，因其病理类型各异，临床表现常有重叠，诊断相 及足细胞数量检测：取肾穿日晨尿100ml(膀胱存留4h以 800 对困难。肾穿刺活检多可以明确诊断，但作为有创检查， 上)，1 r／min，离心半径15em，离心5rain。吸取50¨l 500 有一定的风险。本研究主要探讨是否可以通过尿中足细 尿沉渣于自动涂片离心机甩片1 r／min，离心半径16 胞的数量来判断肾脏疾病的类型及预后。 cm，离心5min，干燥后4℃丙酮固定10rain，晾干。0．01 mmol／L 一、对象与方法 PBS冲洗，加0．5％Triton X一100(美国Sigma)，静置 3 1．研究对象：病例组选取2012年3月至10月在本院rain，PBS冲洗，I％BSA室温20rain。滴加小鼠抗人PCX 肾内科就诊的59例已行肾穿刺活组织检查的患者。依据 山羊抗小鼠二抗(1：50)37℃孵育30 1982年的Lee分级诊断标准确诊为IgA肾病(IgAN)、依据 rain，1m∥L碘化吡啶 Ehrenreich．Churg分期法诊断为膜性。肾病(MN)，依据病理 改变光镜下肾小球结构大致正常，电镜下仅以足细胞足 观察。每次实验均设PBS阴性对照。20例健康对照组尿 突广泛消失诊断为微小病变(MCD)。所选肾脏病均除外标本处理同前。由两位本文作者分别对尿沉渣涂片观察 狼疮肾炎、乙肝或丙肝病毒相关性肾炎、紫癜肾炎、糖尿 计数，每例取2张涂片分别计8次结果，取均数，换算成每 病、肥胖、急慢性肾小管间质肾炎等导致的肾损害。以同 期10例因肾脏肿瘤或肾结核行肾切除术患者的远离病变 定血肌酐，使用EPI—CKD研究公式计算肾小球滤过率。 部作为正常肾组织对照。另选取20例同期血压、生化结 (4)统计学处理：采用SPSS17．0软件，计量正态性资料用 果均正常的体检者为健康对照，留取晨尿100ml。 i±s表示，组间计量资料比较采用单因素方差分析或 Kruskal—Wallis 2．实验方法：(1)肾组织wT一1免疫组化染色及足细 H检验。双正态分布资料相关性采用 胞数量密度的检测：肾组织切片脱蜡，高压抗原修复，3％ Pearson相关分析；非参数指标与其他指标间的相关性采 H：0：避光10rain，l％牛血清白蛋白(BSA)室温封闭20 用Spearman相关分析。P0．05视为差异有统计学意义。 rain，滴加小鼠抗人WT一1(即用型，福州迈新)，4℃孵育过三、结果 夜。复温lh，滴加HRP标记的山羊抗小鼠二抗(1：10)，1．肾小球疾病患者临床资料：原发性肾小球疾病患 孵育10min。链霉素抗生物素蛋白一过氧化物酶孵育10者各组病理分型的一般临床资料及临床生化资料比较见 rain，上色后用自来水终止染色。苏木素复染，梯度脱水， 表1。 二甲苯透明，中性树脂封片．显微镜观察。依