二甲双胍对AMPK、PPARy影响胰岛素抵抗研究.pdfVIP

用免疫组化法检测脂联素、瘦素的表达结果：成功培养人前脂肪细胞并诱导人 前脂肪细胞分化为脂肪细胞。分化组脂联素及瘦素表达水平明显高于未分化组， 而不同浓度的l，25二羟维生素D对分化的脂肪细胞脂联素及瘦素表达水平均 具有影响，差异均具有统计学意义(Po．05)：结论：成功培养人前脂肪细胞并 诱导分化为脂肪细胞为研究脂肪组织内分泌功能提供实验细胞模型。l，25二羟 维生素D对人脂肪细胞脂联素、瘦素的分泌的抑制作用。 二甲双胍对AMPK、PPAR7的影响与胰岛素抵抗的研究 吴乃君l 冯凭2 I天津医科大学2天津医科大学总医院 目的：1、通过观察2型糖尿病模型大鼠脂肪组织中腺苷酸活化蛋白激酶 (AMPK)、过氧化物酶体增殖物激活受体丫(PPAR7)的表达，及二甲双胍对其 影响，探讨二甲双胍改善糖、脂代谢、胰岛素敏感性机制，为二甲双胍的临床应 用提供更多的理论依据。2、通过体外建立3T3．L1细胞胰岛素抵抗模型，应用二 甲双胍进行干预治疗，观察胰岛素抵抗状态下AMPK、PPAR7、葡萄糖转运子4 大鼠30只普通饲料适应性喂养1周后，随机分为正常组(NC组)和糖尿病组(DM 组)。NC组给予普通饲料至实验结束。DM组给予高脂饮食联合腹腔注射小剂量 功后随机分为模型组(DM．C)和治疗组(DM．T)。DM—T组给予盐酸二甲双胍 (Metformin，met)灌胃治疗4周。测定大鼠治疗前后的体重，实验末测定各组大鼠 肾周及睾周脂肪重量，计算大鼠脂体比；检测各组大鼠空腹血糖(fastmgplasma cholesterol，TC)、 glucose，FPG)、胰岛素(insulin，INS)、血清总胆固醇(total 甘油三酯(total cholesterol，TG)、高密度脂蛋白(highdensitylipoprotein，HDL—C)、 低密度脂蛋白的水平(Low density sensitive chain index，ISI)；实时荧光定量(real 数(Fasting time—polymerase Culture 美国国立细胞库(AmericanTypc 对象进行培养和诱导分化。参考AnilKumarKL分化前脂肪细胞的方法，对细胞 进行分化：将3T3．LI前脂肪细胞置于含15％小牛血清的DMEM高糖培养基中， mmol／L 37℃，5％C02饱和湿度下培养。细胞状态良好时接种于培养皿，加入含0．5 的DMEM高糖培养基培养48 h， h，之后换以含lug／mL胰岛素的培养基再培养48 随后以15％小牛血清的DMEM高糖培养基继续培养，2d换培养液1次，诱导分化 8～12 d的3T3．L1细胞，80％～-90％以上呈脂肪细胞表型可用于试验。运用油红O 染色证明前脂肪细胞诱导成为成熟脂肪细胞：移去诱导分化结束细胞的培养基， 脱色，然后用苏木精复染细胞核，倒置显微下观察、照相。3T3．LIJ]旨肪细胞胰岛 素抵抗细胞模型的建立及药物处理。对分化好的细胞分组进行处理：JJIllumol／L 地塞米松诱导胰岛素抵抗，每2d换1次液，取上清液，以培养基中的葡萄糖的消 耗量差值反映胰岛素抵抗的程度。葡萄糖含量用葡萄糖检测试剂盒测定。在胰岛 素抵抗模型成立以后，设空白对照组、地塞米松模型组、药物干预组(不同浓度 二甲双胍)在药物处理48h后检测培养基中葡萄糖含量，及AMPK、PPA脚、 GLUT4mRNA水平。结果：高脂饮食配合小剂量链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型 中，l、体重。二甲双胍治疗前DM大鼠体重LLNC组大鼠体重显著升高；二甲双 胍治疗4NJ后，DM．T组大鼠与DM．C组之间比较，DM-T组大鼠体重下降明显减 轻。2、 肾周、睾周脂肪组