百草枯中毒致大鼠肺纤维化稳定模型建立.pdfVIP

广东省职业健康协会第二届学术交流会论文集，2014年 【毒理】 百草枯中毒致大鼠肺纤维化稳定模型的建立 苏艺伟，朱伟，韦拔雄，李峰，李艳华，高原，刘移民 摘要：目的探索百草枯(_paraquat，Pq)中毒致大鼠肺纤维化的合适染毒剂量，建立可靠、稳定的大鼠肺 纤维化模型。方法第一阶段，50只雄性卯大鼠随机分成五组．每组10只。分别一次性腹腔注射0、15、18、 20、25u培／kg的百草枯，根据实验结果筛选建立模型的合适染毒剂量；第二阶段，40只雄性SD大鼠随机分成两组， 每组20R，即对照组和染毒组(1Smg／kgPQ)，两组分别于3、7、14、28天各麻醉处死5只大鼠。进行大鼠肺组 织病理学检奋、测定肺组织的脏器系数和羟脯氨酸含量。结果第一阶段实验中，1细g／kg组染毒后捣天行为、 体重的变化规律以及28天肺组织纤维化的病理改变，均符合百草枯中毒的特征，症获明显，而且在观察期内未 出现死亡，故以18雌Jkg的剂量作为建立模型的合适剂量。一次性腹腔注射18mg／i谵百草枯，肺组织病理切片眶 和I篮s∞染色均出现从炎症到纤维化改变的演变过程。染毒组肺脏器系数均高于同期对照组，除14天组外，差 异有统计学意义(尺o．05)。染毒组肺组织羟脯氨酸含量均高于同期对照组，且存在统计学差异(tKO．05)。结 论选择合适的百草枯腹腔注射剂量，可以观察到百草枯中毒致大鼠肺纤维化动态演变过程，建立稳定的肺纤 维化丈鼠模型。 关键词：百草枯：染毒剂量；肺纤维化；脏器系数；羟脯氨酸 百草枯(paraquat，PQ)，1，l’—二甲基一4，4’—联毗啶阳离子，是一种高效、触杀型除草剂，在全 球除草剂使用量中位居第二位。它具有杀草谱广、起效快、使用方便、遇土钝化、不伤根系、保持水土 等特点，不仅为农业，而且为社会和环境创造了巨大的效益。如果使用不当，它对人类和动物来说是一 种致命性的毒物。自杀、误服和职业暴露是百草枯中毒的主要方式，近年来百草枯中毒事件屡见不鲜， 中毒率维持在一个较高的水平。由于目前尚缺乏百草枯中毒特效解毒药物，百草枯中毒致死率高达4傩～ 8嘣n1，是居单病种急性中毒病死率之首圆。肺组织是百草桔中毒的主要靶器官，中毒患者早期多因呼吸 衰竭或多器官功能障碍而致死，即使早期抢救成功的患者，后期大部分患者也不可避免的引发肺纤维化， 导致呼吸功能障碍而死亡。目前对百草枯中毒致肺纤维化的具体机制还不是很明确，因此建立稳定、可 靠的肺纤维化动物模型，为研究百草枯中毒致肺纤维化的分子机制和临床治疗寻求有效的解毒药物提供 理论基础 1对象和方法 1．1化学试剂 百草枯标准品，纯度为∞．跳，购自北京和力顺科技有限公司；大鼠羟脯氨酸试剂盒(碱水解法)购 自南京建成科技有限公司；戊巴比妥钠购自sigma公司：多聚甲醛、酒精、T0型透明剂、二甲苯、脏和M醛son 染色试剂均购自广州化学试剂厂。 1．2实验动物 应5～7天，自由饮水、进食，体重达到要求后进行实验，实验时大鼠体重200__．109。 市“121人才梯队工程”后备人才项目。 作者单位：1．中山大学公共卫生学预防医学系(广东广州510080)：2．广州市职业病防治院、广州市医学重点 学科职业健康监护科、广州市职业环境与健康效应实验室(广东广州510620)；3．广州市疾病预防控制中心(广东广 州510440)． 作者简介：苏艺伟(1988．10)，男，医学硕士，中山大学公共卫生学院在读研究生，主要研究方向为职业医学 通讯作看：刘移民，主任医师，E-rail：理!i遁!@163．c叩。 307 广东省职业健康协会第二届学术交流会论文集，2014年 1．3实验设计 实验分两个阶段完成，第一阶段50只sD雄性大鼠，随机分成五组，分别为O、15、18、20、25Ⅲg／l【g 等五个组，每组10只，0mg／kg组腹腔注射lml无菌生理盐水，各个染毒组腹腔注射相应的百草枯剂量(百 草枯纯品于染毒当天用无菌生理盐水稀释成4Ⅲg／Ⅲl，用0．45urn滤膜过滤后备用)，记录五组大鼠染毒后 露胸腔，游离肺组织，称量肺组织湿重，肺左叶用4％多聚甲醛固定，右叶-80。保存用于羟脯氨酸含量等