雷公藤多甙对早期糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1表达的影响.pdfVIP

中国中医药科技2011年3月第 l8卷第2期 Mar．2011Vo1．18No．2 ·l25 · 雷公藤多甙对早期糖尿病肾病大 鼠 肾组织 TGF—l3 表达的影响木 宋纯东 薛黎明 (河南中医学院第一附属医院 ·郑州450008 郑州市第二人民医院 ·郑州450000) 摘 要 目的：探讨雷公藤 多甙(TⅣ)对糖尿病肾病 (DN)模型大鼠肾组织 中TGF一13表达的影响。方 法：采用高脂饲料+链脲佐菌素诱导糖尿病肾病造模 ，用Tw灌胃DN大鼠，生化检测实验大鼠24小时尿 蛋 白、血肌酐(SCr)、尿紊氮(BUN)、血浆 白蛋白(ALB)；LeicaQwinPlus图像分析系统测量肾小球直径； PAS染色观察大鼠肾脏病理变化；免疫组化(IHC)检测肾组织TGF—B。表达。结果：TⅣ能够降低实验大 鼠24小时尿蛋 白、SCr、BUN，升高ALB，减小肾小球直径及减轻 肾重，改善 肾脏病理变化及降低 肾组织 TGF一13．表达 ，与模型组相比，具有统计学意义 (P0．05或P0．01)。结论 ：唧 可能通过影响DN大 鼠肾组织中TGF—B．的表达，改善上述生化指标，减轻肾脏病理损害。 主题词 糖尿病肾病 ／中医药疗法 雷公藤多甙／治疗应用 糖尿病肾病 ／病理学 大鼠 随着雷公藤多甙(TW)在肾病领域的广泛应用 ，大量临 调整给药剂量；正常组 、模型组均灌服等量生理盐水。 床和实验研究均证实 对糖尿病肾病 (DN)有降低蛋 白 1．4 观察指标及测定 将大鼠于造模成功后灌胃第6周 尿、保护肾功能的作用 ¨J。近年来，对 DN的基础研究表 末，禁食不禁水 ，留取24小时尿液，并于第二天麻醉后，股动 明，转化生长因子 一B(transfomlinggrowthfactor～B，TGF— 脉取血 2ml，用 AU800全 自动生化分析仪检测 ALB、BUN、 B)在 DN发病机制 中占有重要地位 。本研究通过观察 SCr和24小时尿蛋 白。处死大鼠，切取左侧肾脏，去掉被 TⅣ对DN大鼠肾组织内TGF—B表达及与临床生化指标改 膜，用冷生理盐水灌洗以除去肾脏血管内血液，立即称重后 善的相关性 ，以期为临床应用Tw治疗DN提供实验依据。 计算肾脏肥大指数。取少量。肾组织，常规制片，作 PAS染 1 材料与方法 色，光镜下放大400倍观察肾脏病理变化 ，LeicaQwinPlus图 1．1 主要药物及试剂 片：江苏美通制药有限公司，批 像分析系统测量’肾小球直径。免疫组化 (IHC)法 (操作按试 号：081118，以蒸馏水溶解稀释为 0．5mg／ml。链脲佐菌素 剂盒说明进行)检测肾组织TGF—B 表达。 (STZ)：Sigma；兔抗大 鼠TGF—p，一抗、生物素标记山羊抗 1．5 统计学处理 采用 SPSSVersionl3．0forWindows进行 兔 IS,G、DAB显色剂：中杉金桥生物有限公司等。 数据统计，以均数 ±标准差 (±s)表示 ，组间比较采用单因 1．2 动物分组及模型复制 清洁级雄性 SD大鼠3O只，体 素方差分析 (One—wayANOVA)。 重 (80±5．2)g，2—3周龄 ，购 自河南省实验动物中心，许可 2 结果 证号：SCXK(豫)2oo9～0OO9。适应性饲养 1周后 ，随机分为 2．1 各组生化指标的测定 结果见表 1。 3组，正常对照组 (正常组)、模型对照组 (模型组)、 组各 表I 各组生化指标的比较(：±。n=lO) lO只。正常组普通饲料喂养 (12g／d)，另两组予以高脂饲料 (60％普通饲料、10％的猪油、5％胆 固醇、10％蛋黄粉和 10％蔗糖)，随着 日龄增大投料随之增多。6周后，过夜禁食 14小时 (不禁水)称重，正常组按 30mg／kg腹腔注射生理盐 水，余两组一次性腹腔注射 STZ3Omg／kg(溶于 0．1moL／L、