羟乙基淀粉的羟乙基取代位置的研究.pdfVIP

( ) 第 31 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究报告 第 3 期 　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2003 年 3 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 271～276 羟乙基淀粉的羟乙基取代位置的研究 刘叶民　徐桂芸 ( 中国科学院化学研究所分子科学中心 ,工程塑料国家重点实验室 , 北京 100080) 何 　蕾 　江朝光 　李佳春 　宋 　光 　梅世昌 ( 中国人民解放军总医院 , 北京 100853) 摘 　要 　将羟乙基淀粉进行甲基化水解还原乙酰化反应 ,产生羟乙基葡萄糖的部分甲基化糖醇乙酸酯衍生 ( ) ( ) 物 , 应用气相色谱化学电离质谱 GCCIMS 和气相色谱电子轰击质谱质谱 GCEIMSMS 联用技术研究了羟 乙基在淀粉糖环上的取代位置 ,发现 C2 位取代的量是总取代量的 82 . 0 % 。 关键词 　淀粉 ,羟乙基 ,取代位置 ,气相色谱质谱 1 　引　　言 将羟乙基引入支链淀粉的葡萄糖环称为羟乙基淀粉(hydroxyethyl starch , HES) 。引入羟乙基的淀粉 α 是 14 糖苷键连接的葡聚糖 ,平均分子量在 40 ,000 ～200 ,000 。HES 可作为血浆代用品 , 用于需要全 血 、血浆治疗的病例[ 1] 。HES 代替血浆的优点是不必考虑血型相匹配 ,并且可避免由于输血造成的病毒 ( 感染 。近年来研究发现 ,人体内淀粉酶分解羟乙基淀粉的速度与羟乙基在葡萄糖环上的位置 C3 、C2 或 C6) 和各位置上的取代量有着密切关系[2 ] 。因此 ,建立检测葡萄糖环上羟乙基取代位置和取代量的 方法 ,对于设计和开发高疗效的淀粉衍生物药物有着重要的意义 。通常应用氢碘酸滴定测定羟乙基在 糖环上总取代量的方法[3 ] 已经满足不了目前研究的需要 。本工作将 HES 衍生为羟乙基葡萄糖的部分 甲基化糖醇乙酸酯衍生物 ,应用 GCMSMS 联用技术研究了羟乙基在糖环上取代的位置和在各个位置 取代的量 。 2 　实验部分 2. 1 　仪器和试剂 4 160 型气相色谱仪( ) ( ) 意大利 Carlo Erba 公司 ;Qp 5050A 型 GCMS 联用仪 日本岛津公司 ;Autospec ( ) ( ) Ultima ETOF 型 GCMSMS 联用仪 英国质谱公司 ;Avance DRX500 超导核磁共振仪 Bruker 公司 。 HES 为中国人民解放军总医院制备 。使用玉米淀粉和环氧乙烷为原料 , 采用有机溶剂法工艺制 备 ;硼氢化钠 、氢氧化钠和三氟乙酸购于 Fluka 公司 。碘 甲烷购 自北京化学试剂公司 。三氯甲烷 、二甲 基亚砜 、无水甲醇 、吡啶、乙酸酐和其它化学试剂均为北京化工厂产品。以上化学产品均为分析纯 。 2. 2 　实验方法 2. 2. 1 　HES 的甲基化[4] 　取干燥的 HES 6 mg ,加入 2 mL 二甲基亚砜 ,充氮气密封后超声溶解 10 min , 加入 NaOH 粉末大约 40 mg ,逐滴滴入 2 mL 碘甲烷 ,避光静置 4 h 后加入 4 mL 水终止反应 ,加入 4 mL 三 氯甲烷萃取后离心移去水相 ,用氮气除去有机溶剂 。真空干燥