第六章微生物的生长及其控制(刘).pptVIP

第六章 微生物的生长繁殖及其控制 本章内容 二、微生物的培养方法 6.1.2微生物的同步生长及同步培养方法 直接法——血球计数板法 用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。血细胞计数板是一块特制的厚载玻片，其上由四条槽构成三个平台，中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为9个大方格，中间的大方格即为计数室。 计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，每个中方格又分成25个小格（即16x25），另一种是一个大方格分成25个中方格，每个中方格又分为16个小方格（即25×16）。 计数时，如果使用16×25的计数板，要按对角线方位取左上、左下、右上、右下上述4个中格进行计数；如果使用25×16规格的计数板，则除了计数上述4个中格外，还要计数中央的1个中格。分别按下述公式计算出酵母细胞数。 菌种：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）。 仪器：显微镜，血球计数板等。 其他：盖玻片，生理盐水，吸管，吕氏美蓝染液，擦镜纸，吸水纸等。 注意事项 间接计数法(活菌计数)——平板菌落计数法 典型的生长曲线 （Growth curve） 生长的数学模型 6.2.2单细胞微生物的群体生长的主要参数 生长速率常数R 比生长速率 作用方式：影响微生物的生长速率和总生长量 生长限制因子：凡是处于较低浓度范围内，可影响生长速率和菌体产量的营养物就称生长限制因子 杀灭 灭菌：杀菌＆溶菌 消毒：仅杀死病原菌 抑制 防腐：抑制霉腐微生物 化疗：抑制宿主内的病原菌 灭菌：采用强理化因素使物体内外的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。 无菌：不存在活菌。 无菌操作：采取防止一切微生物进入某一范围的方法。多指微生物实验和外科手术的操作过程。 消毒：采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部病原微生物的方法,并不一定能杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。 用以消毒的化学药物称为消毒剂。 方法：70％酒精消毒、巴氏消毒法等 防腐：采用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，即通过抑制菌作用防止食品、生物制品等发生霉腐的措施。 化疗：利用具有高度选择毒力即对病原菌具高度毒力而对其宿主基本无害的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，借以治疗该宿主传染病。 化学治疗剂：磺胺类、抗生素、生物药物素＆若干中草药中有效成分等。 高压蒸汽灭菌器中温度与压力的关系 灭菌锅内空气的排除程度验证 灭菌锅上同时装有压力表和温度计 将待测气体通过橡胶管引入深层冷水中 灭菌后知道：在灭菌后要知道当时的灭菌温度是多少，可在灭菌的同时，采取以下方法进行验证： 1、放入耐热性较强的试验菌种——嗜热脂肪芽孢杆菌，灭菌后，在适宜的培养基中进行培养，看它是否被杀死； 2、放入硫磺(熔点115℃)、乙酰替苯胺(116℃) 或脱水琥珀酸(120℃)等结晶，看其是否熔化等。 抗生素 生物药物素(biopharmaceutin) 生物药物素是具有多种生理活性的比抗生素疗效更为广泛的微生物次生代谢产物。 酶抑制剂 免疫调节剂 受体拮抗剂 抗氧化剂 各种表面消毒剂杀菌能力的比较标准： 石炭酸系数： 指在一定时间内被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度和达到同效的石炭酸的最高稀释度的比率。一般规定处理时间为10分钟，而供试菌定为Salmonella typhi（伤寒沙门氏菌）。 在临床上最早使用的消毒剂----石炭酸 皮肤、水果、蔬菜 皮肤、物品表面 水果、蔬菜、塑料等 氧化蛋白质活性基团，酶失活 0.1%高锰酸钾 3%过氧化氢 0.2%—0.5%过氧乙酸 氧化剂 地面、器具 皮肤 地面、器具 破坏细胞膜、蛋白质变性 3%—5%石炭酸 2%来苏儿 3%—5%来苏儿 酚类 房间、物品消毒（不适合食品厂） 蛋白质变性 0.5%—10%甲醛 2%戊二醛（pH=8） 醛类 皮肤、器皿 脱水、蛋白质变性 70%—75%乙醇 醇类 应用范围 作用原理 名称及使用方法 类型 常用的表面消毒剂及其应用 常用的表面消毒剂及其应用 应用范围 作用原理 名称及使用方法 类型 皮肤、粘膜、器械 皮肤、金属、棉织品、塑料 蛋白变性、破坏细胞膜 0.05%—0.1% 新洁尔灭 0.05%—0.1% 杜灭芬 表 面 活 性 剂 非金属器皿 皮肤、粘膜、伤口 皮肤、新生儿眼睛 防治植物病害 蛋白质变性、酶失活 变性、沉淀蛋白 蛋白质变性、酶失活 0.05%—0.1%升汞 2%红汞 0.1%—1%硝酸银 0.1%—0.5%硫酸铜 重