SD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立及NSAIDs的干预治疗.pdf

sD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立及NsAIDs的干预治疗 sD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎 l 模型的建立及NSA Ds的干预治疗 研究生：郑建筝 导师：高聪主任医师 广州医学院神经科学研究所广州医学院第二附属医院 广州市昌岗东路250号(510260) 中文摘要 AutoiⅡlInune 实验性变态反应性脑脊髓炎(Experimen诅l 是实验动物发生的，由同种型，同种异型，异种异型致脑炎抗原诱导产生的，由细 胞免疫反应介导的，以中枢神经系统白质脱髓鞘为特征的迟发型超敏反应性自身免 Sclerosis，MS)极为相似的临床、 疫性疾病。EAE具有与人类多发性硬化(Multipk 生化、免疫及病理特征，是研究Ms理想的动物模型。文献报道的制各EAE模型的 方法很多，其敏感品系多为啮齿类动物，如Lewis大鼠，S几小鼠，PJ小鼠等。但 国内缺乏相关的敏感品系，所以我们尝试用国内常见的非敏感品系SD大鼠建立EAE 模型。 小胶质细胞占胶质细胞总数的10％～20％。既往的研究表明该细胞来源于骨髓 的单核干细胞，在胎儿发育早期已广泛存在于中枢神经系统，被认为是中枢神经系 AE 统中主要的宿主巨噬细胞(M中)。然而，近年来大量实验研究表明，在Ms和E 中，小胶质细胞除了具有臣噬细胞的吞噬功能之外，尚能发挥破坏髓鞘和少突胶质 细胞的多种细胞免疫功能，是神经元变性、坏死的效应细胞。所以，在小胶质细胞 活化早期适当抑制它的活化反应，能减少不必要的细胞毒作用和病理损害。 NecrosisFactor 肿瘤坏死因子Ⅱ(nmor A1pha，1NF．Ⅱ)作为触发Ms的重 要炎症细胞因子，在Ms的免疫机制中起着重要的作用。在Ms病变中已经证明有 许多TNF．o免疫阳性的细胞，主要是胶质细胞和巨噬细胞，TNF，a在组织培养中， 可以破坏少数胶质细胞，诱导髓鞘降解。已经证明，在EAE易感鼠的胶质细胞与 抵制B幢鼠的胶质细胞相比，前者表达较多的TNF．a。在活动的MS的CNs斑 sD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立及NsAIDs的干预治疗 共聚焦显微镜观察脑组织中小胶质细胞的形态和数量，应用免疫组化和ELIsA观察 脑组织及外周血中TNF—q的表达。本试验所得数据用t检验，p0．05为有显著差异， po．0】为有非常显著差异。 【结果】 1、使用同种脑脊髓匀浆，多次注射雌性sD大鼠诱导的模型，其发病持续时间分别 明显优于其他组别。病理学证实发病大鼠具有多发性硬化典型的病理改变。 2、正常大鼠的脑组织中可看到散在，均匀分布于皮质和白质的小胶质细胞，呈细小 分枝状。EAE大鼠发病前可观察到小胶质细胞开始激活，胞体轻度变大，数量较正 常增多，呈高度分枝状。发病初期到高峰期小胶质细胞激活达高峰，在病灶处，小胶 质细胞高度聚集，形态多异，以阿米巴状、圆状为主，胞体明显增大，呈多边形、 圆形或不规则形胞体。EAE缓解期的小胶质细胞与发病前相似，呈高度分枝状。 两治疗组大鼠脑组织中小胶质细胞的阳性细胞数在高峰期和EAE组相比，有统计学 意义(庐O．05)，且两治疗组之间相比也有统计学意义(po．05)。 3、免疫组化染色显示TNF．n阳性细胞胞体均较小，星卵圆形、梭性或三角形。胞 浆浓染，突起较少，大多为小胶质细胞。各组大鼠脑组织中TNF-n的阳性细胞数及 外周血中TNF．a的含量在EAE大鼠发病之前已经升高，并持续到高峰期。两治疗 组大鼠脑组织中TNF．q的阳性细胞数及外周血中1NF-a的含量在高峰期和EAE组 相比，有统计学意义(po．05)，且两治疗组之间相比也有统计学意义(p0．0