苔海绵Tedania+sp．多糖及其中硫酸根含量测定.pdfVIP

维普资讯 第21卷 第4期 青 岛大学学报 (工程技术版) Vol_21No．4 2006年 12月 JOURNALOFQINGDAOUNIVERSITY (ET) Dec．2006 文章编号 ：1006—9798(2006)04—0025—04 苔海绵Tedaniasp．多糖及其中硫酸根含量测定 薛 峰，张立新 (青岛大学化学化工与环境学院，山东青岛266071) 摘要：为测定苔海绵 Tedaniasp．多糖及其中硫酸根含量，分别用水提和酸提法制备粗多 糖，用苯酚一硫酸法显色，测定多糖含量，并用硫酸钡比浊法对其中的硫酸根含量进行了测 定。测得水提和酸提粗多糖中总糖含量分别为 16．799，6，2o．55 }硫酸根含量分别为 24．o2 ，27．o2 。结果说明酸提法得到的粗多糖含量及其中硫酸根的含量大于水提法。 关键词：Tedaniasp．；多糖}硫酸根 ；苯酚硫酸显色法 中圈分类号：Q539．7 文献标识码：A 海绵是一种低等的多细胞多孔动物，种类繁多，分布广泛。从海绵中可分离出多种具有抗肿瘤、抗病毒、 抗菌功能的活性物质，如萜类、生物碱、肽类等n]，但对于海绵多糖的研究并不多，KaoruWarabi等从 日本海 绵Axinellainfundibula中得到一种多糖 AxinellosideA，可作为端粒酶的抑制剂[2]。并且据研究，含有硫 酸基团的糖复合物(如糖蛋白、蛋白聚糖以及硫酸酯化多糖)是一大类重要的生物活性物质，具有抗肿瘤、抗 病毒、增强细胞免疫和体液免疫功能及抗衰老等作用[a]。该类多糖的许多生物活性功能除与多糖结构、水溶 性及分子量大小等有关外，还与硫酸基的含量有着直接的联系。本文分别用水提和酸提法从采于青岛海域 苔海绵 Tedaniasp．中制得多糖，用苯酚一硫酸显色法，测定其中总糖含量，并用硫酸钡比浊法对其中的硫酸 根含量进行了测定。希望本文的工作能为推动海绵多糖的研究做一点贡献。 材料、仪器与试剂 实验材料；苔海绵，采于青岛沙子 口海域，新鲜时洗净泥砂 石块等杂质，切碎备用 仪器：753oG紫外一可见分光光度计}TDL一40B型离心沉淀机}DHG一9245A型电热恒温鼓风干燥箱。 试剂：959，5乙醇、浓硫酸、葡萄糖、明胶、氯化钡、硫酸钾等试剂均为分析纯。 2 粗多糖的提取与精制 2．1 粗多糖的水提取 取 120g海绵于烧瓶中，加入 500mL3．7 甲醛溶液搅拌，浸泡过夜}次 日加入 1000mL蒸馏水置于 75℃水浴中搅拌提取5h，趁热抽滤；将滤渣同样操作，重复3次}合并滤液，减压浓缩至其体积的四分之一， 向滤液中加入4倍体积的95 乙醇，静置过夜}离心，将沉淀分别用乙醇、丙酮洗涤3次，36℃干燥得海绵水 提粗多糖 。 2．2 粗多糖的酸提取 取 37g海绵于烧瓶中，加入 1000mL0．1mol／mLHC1溶液，4O℃搅拌2h后过滤 ；将滤渣同样操作， 重复3次；合并滤液，减压浓缩至其体积的四分之一；向滤液中加入4倍体积的95 乙醇，静置过夜；离心， 将沉淀分别用乙醇、丙酮洗涤 3次，36℃干燥得海绵酸提粗多糖。 收稿 目期：2006—10—17I修 回日期：2006一l1—29 基金项 目：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金赞助项 目(2005BSI1014) 。 作者简介 ：薛峰(1981～)，男，山东青岛人 ，硕士研究生，主要从事天然产物的开发与应用。E-mail,zhanglixinO1@sina．corn 维普资讯 26 青 岛大学学报 (工程技术版) 第2l卷 2．3 粗多糖的精制L4 将海绵粗多糖用蒸馏水在Z5℃水浴下溶解，离心去除沉淀；按上清液体积 1／5加入 Sevage试剂 (V(氯 仿)。V(iE丁醇)一5t1)，充分振荡，静置}取