正交试验优化L-色氨酸发酵培养基的研究.pdfVIP

安徽农业科学 ，JournalofAnhuiA ．Sci．2011，39(4)：1910—1911，1914 责任编辑 乔利利 责任校对 况玲玲 正交试验优化 L-色氨酸发酵培养基 的研究 王东阳 ，蔡传康 ，闰汝东，冯志彬 ，张华 (1．天津科技大学生物工程学院，天津 300222；2．山东省济宁高新区协合生物工程研究所，山东济宁 272000) 摘要 [目的]优化L一色氨酸发酵培养基。[方法]以大肠杆菌TRJH0709为供试菌株，通过单因素和正交试验研究了L一色氨酸合成的最 佳发酵培养基。[结果]L一色氨酸最适发酵培养基为葡萄糖50．0g／L、硫酸铵15．0g／L、酵母粉 1．5g／L和柠檬酸2．0g／L。其中葡萄糖 对试验效果影响最大。在该最优条件下，L一色氨酸摇瓶产量可达 19．0g／L。[结论]为L一色氨酸的中试及工业化生产提供 了理论依据。 关键词 L一色氨酸；正交试验 ；培养基优化 中图分类号 TQ922 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2011)04—01910—02 Optimization ofL-tryptophanFermentationM edium by0rthogonalExperim ent WANGDong-yangetal (CollegeofBiotechnology，TianjinUniversityofScience＆Technology，Tianjin300222) Abstract [Objective]TheaimwastooptinfizeL—tryptophanfermentationmedium．[Method]ThemediumofE．coliTKIH0709forthepro— ductionofL—tryptophanwasoptimizedbysinglefactorexperimentandorthogonaldesignmethod．[Result]Themainfactoraffectingtheprodu· ci“gL—tryptophanwasglucoseamongtheorthogonalconditions．Th eoptimum femr entationmedium ofL—tryptophanwasglucose50．0g／L，am— monium sulfate15．0g／L，yeastextract1．5g／Landsodium citrate2．0g／L．Undertheoptimalcondition，L—tryptophanproductionreached 19．0g／L．[Conclusion]TheresearchprovidestheoreticalbasisofrthepilottestandindustrialproductionofL-tryptophan． Keywords L—tryptophan；Orthogonalexperiment；Medium optimization L一色氨酸是人体和动物生命活动中8种必需氨基酸之 SO4·7H2O0．1g／L，(NH4)2SO420．0g／L，pH值 7．0～7．2， 一 ， 对人和动物的生长发育及新陈代谢具有重要作用，被称 115℃高压蒸汽灭菌 15min。 为第二必需氨基酸，广泛应用于医药、食品和饲料等方面…。 1．3培养方法 近年来，国内外饲料工业发展迅速，L．色氨酸在医药工业上 1．3．1 种子培养。将 1支生长 良好的活化斜面菌苔转入装 的用途不断扩大，从而使L一色氨酸成为一种国际市场发展前 有400m1种子培养基的5L三角瓶中，9层纱布封 口，置于巡 景良好 、中国市场需求较大的产品，且其原料来源丰富，生产 回式摇床 (200r／rain)上 ，32℃振荡培养8h。 技术成熟。但国内仍不能大规模生产 L一色氨酸 ，在上海 、武 1．3．2 发酵培养。按 10％的接种量将培养成熟的种子接 汉 、北京等地有小规模生产，主要用于制药，尚无厂家生产饲 人发酵培养基 ，置于巡 回式摇床 (220r／min)上 ，32℃振荡 料添加剂用的L一色氨酸 。 培养40h，培养过程中流加 7