不同种系梅花品种组织培养繁殖研究.pdfVIP

不同种系梅花品种组织培养繁殖研究1 1，2 1 吕英民* ，曹亮 ，张启翔1 1. 北京林业大学园林学院，北京，（100083 ）； 2. 国家花卉工程技术研究中心，北京（100083 ） 摘 要：本研究以‘铁骨红’梅（真梅系）、‘美人梅’ （樱李梅系）和‘燕杏’梅（杏梅系）为试 验材料，建立了梅花的外植体生长、扩繁、生根的基本培养程序。其中适合‘铁骨红’生长的 最佳培养基是改良QL 培养基，即QL 大量元素＋P 培养基微量＋MS 有机＋2 倍MS 铁 盐，该培养基解决了黄化、顶端死亡等组织培养中比较严重的问题。最佳的增殖培养基是改 -1 6-BA ＋0.05 mg•L-1 NAA ＋4mg•L-1 AgNO ，其中AgNO 的使用应该注 良QL ＋1.0 mg•L 3 3 意使用的时间，长时间使用会导致试管苗生长畸形。最佳的生根培养基是 1/2 改良 QL ＋ -1 -1 -1 0.3 mg•L NAA ＋0.1 mg•L IBA 。‘美人梅’和‘燕杏’的增殖培养基分别是：WPM ＋1.0 mg•L 6-BA ＋0.1 mg•L-1 NAA 和 MS ＋0.5 mg•L-1 6-BA ＋0.05 mg•L-1 IBA 。生根培养基分别是 1/2WPM ＋0.5 mg•L-1 NAA 和1/2MS ＋IBA0.5 mg•L-1 。 关键词：梅花（Prunus mume ）；组织培养；茎段外植体；离体快繁 梅花是我国的传统名花，在我国有悠久的栽培历史和丰富的栽培品种，但是梅花还只是 在世界少数几个国家栽培应用[1]，其中限制梅花出口的重要因素就是病毒，所以培育无病毒 梅花苗木是十分重要的，与此同时梅花的离体快繁工作是建立梅花遗传转化体系的前提，无 性系的建立以及试管苗的获得可以为下一步的转基因育种工作提供重要的试材，同时也是下 一步愈伤组织诱导分化成苗培养试验中的一部分[2] 。 目前通过茎段培养建立植物无性快繁体系，已经成为科研及生产育苗的重要手段。而在 梅花上取得的进展还很小。只是个别梅花品种实现了组织培养离体繁殖[3-5 ] 。但是梅花目前 有300 多个品种，分属不同的系和型[1]，各个品种在组织培养过程中的存在很大差异，同时 在培养过程中经常出现黄化、增殖系数低、顶端死亡等问题[2] 。因此，本研究旨在探寻适合 不同种系梅花离体培养的基本培养基，并且找到合适的激素种类以及浓度，解决培养中遇到 的黄化等问题，建立若干梅花品种的离体快繁体系，尤其是真梅品系的离体快繁体系，从而 为进一步愈伤组织诱导再生植株奠定基础。 1 材料与方法 1.1 试验材料 所用的外植体取材于北京林业大学梅菊圃和无锡梅园，分别是杏梅系单瓣杏梅型的‘燕 杏’ （杏梅系）、樱李梅系美人梅型的‘美人梅’以及真梅系朱砂型的‘铁骨红’共三个品种。 1.2 试验方法 1.2.1 外植体预处理 春季（无锡地区4 月上中旬、北京地区5 月份）选取优良的梅花栽培品种生长期生长旺 盛的当年生半木质化枝条，去除表面污垢后剪成 1～2cm 长的具节茎段，每个茎段 1～2 个 腋芽。用洗洁精浸泡 10～20min ，流水冲洗30min，而后在超静工作台上进行表面灭菌。其 它季节（花芽开始分化以后）则选取生长健壮的徒长枝为外植体。用 75% 的酒精表面消毒 30s，用无菌水冲洗1 次，接着用0.1%的升汞消毒3～6min （根据不同材料种类选择不同的 1 国家自然科学基金资助项目）。 *通讯作者，Luyingmin@ -1- 消毒时间），吐温1～2 滴