一种植物RNAi双元载体的构建.pdfVIP

0fArdaui 责任编辑张杨林责任校对夏蓉 安徽农业科学．Journal A鲥．Sci．2009．37(8)：3474—3476，3519 一种植物RNAi双元载体的构建 谭秀华1，宋晓冬1，杨明1，于敏1，马立新2’ (1．滨州医学院遗传学教研室，山东烟台264003；2．湖北大学生命科学学院分子微生物学与基Ill-r程实验室，湖北武汉430062) 质粒pHBMTl4。[结论]该栽体的成功构建为以后的植物基因组功能研究提供了技术平台。 关键词RNAi；构建；基因克隆；双元栽体 中图分类号S188文献标识码A 文章编号0517—661l(2009)鸺一03474—03 ConstructionofAIdmiofPhntRNAi Vector Binary TAN et of Medical Xiu．huaal(LaboratoryGenetics．BinzhouUniversity．Yantai，Shandong264003) reⅫchaimedto thefoundationfor RNAito the of serial Abstraet『Objective]The lay utilizing studygenomie如nctionplants．[Method]A RNAivectorwereclonedPCR were inverted ofelementsfor the and repeatfragments，，Ⅲ(nopalinesyn· constructing by puttogether．The th蛾terminator obtained．ThewasCaMV35S mosaicvirus35S two signal)．were promoter promoter(cauliflowerpromoter)andtargeting$e- flurescence quenees，aada(encodingaminoglycoside3’-adenylytransforase)and疥(encodinggreen protein)，were vectorwasmadeoftheelementsandthe alsowas舶theterminator WAg拍the plasmid and疥also reportergene．Theintresting pCAM- thefoundalionof山esevenkindsofmiddlevectors，the obtained．[Conclu- BIAl301．[Result]Through plasmidpHBMTl4w拍successfully sion1Theconstructionof offeredthe tO functionof pHBMTl4 techniqueplatformstudy山egenomie plants． vector KeywontsRNAi：Conatuction；Genecloning：Binary RNA干扰(RNAinterference，RNAi)是近年来发展起来 的研究生物体基因表达、调控与功能的一项崭新技术。RNAiCA嗍GAGCAACf_,CX-3’：P2： 是指通过反义RNA与正链RNA形成双链RNA特异性的抑 制靶基因的转录后表达的现象¨。21，该现象又称为序列特异