兔出血症病毒NJ85株衣壳蛋白基因在原核系统中的高效表达.pdfVIP

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2015-08-26 发布于重庆
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兔出血症病毒NJ85株衣壳蛋白基因在原核系统中的高效表达.pdf

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兔出血症病毒NJ85株衣壳蛋白基因在原核系统中的高效表达.pdf

业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2004,12 (4): 408~4 11 ·研究论文· 兔出血症病毒NJ85 株衣壳蛋白基因在原核系统中的高效表达 1,2 1 2 永山陆承平 * 周宗安 (1.南京农业大学动物医学院，南京210095 ；2. 华东医学生物技术研究所，南京210002) 摘要：从兔出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus ，RHDV ）中国早期流行株NJ85 中成功地克隆出衣壳蛋白（）基因。序列分析表明该基因长度为 1 740 nt ，编码579 aa ，与已报道的另2 个RHDV 中国毒株WX84 和TP 的基因的同源性分别为92.7%和97.2% 。构建了NJ85 株基因原核表达质粒pET- ，用SDS分析，重组VP60 蛋白的表达量占菌体总蛋白的40% ，分量约62 kD ，在菌体内以包涵体形式存在。免疫印迹实验表明，重组VP60 蛋白与RHDV 抗体反应形成 1 条带，证明它具有抗原性。：（）；表达关键词兔出血症病毒；衣壳蛋白基因 High Expression of the Capsid Protein Gene of the Chinese Early Isolate NJ85 of Rabbit Hemorrhagic Disease Virus in 1,2 1 2 WANG Yong-Shan LU Cheng-Ping * ZHOU Zong-An ( 1. College of Veterinary Medicine, Nanj ing Agricultural University, Nanjing 2 10095, China ； 2. Huadong Research Institute of Medical Biotechnics, Nanjing 210002, China ) The capsid protein ( ) gene of Rabbit hemorrhagic disease virus (RHDV) isolate NJ85 was amplified and sequenced. The gene of NJ85 was in size of 1 740 nt and encoding 579 aa. Comparison with the other Chinese field isolates WX84 and TP , the homology of nucleotide sequence was 92.7% and 97.2% respectively. The expression plasmid pET- c