兔肾微血管内皮细胞体外培养及其细胞表型的初步研究.pdfVIP

中国微循环2003 年 12 月第 7 卷第 6 期 ·381 · ( ) 文章编号 : 1007 - 8568 2003 06 - 0381 - 04 ·方法学 · 兔肾微血管内皮细胞体外培养 及其细胞表型的初步研究 刘新晖 , 张锡庆 , 王晓东 , 张学兰 , 王科文 , 张 亚 , 张德强 , 张希峰 【摘要】 目的 探索肾微血管内皮细胞的体外培养方法 ,并对其进行鉴定和表型研究 ,拟为骨组织 工程再血管化提供理想的种子细胞。方法 采用三步梯度筛网法 ,先获得较高纯度的肾血管球 ,再应用 肾血管球外植法体外培养肾微血管内皮细胞。进一步对肾微血管内皮细胞进行免疫组化法的 Ⅷ因子相 关抗原鉴定 ,用透射电镜观察细胞浆 Weibel-Palade 小体 , 以及采用间接免疫荧光法检测CD31 、CD34 及 CD44 表达。结果 体外培养出纯度很高的血管内皮细胞并培养了 11 代。此外 ,免疫组化显示 Ⅷ因子相关 抗原阳性 , 电镜下观察到 Weibel-Palade 小体 , 以及间接免疫荧光检出CD31 、CD34 表达阳性 ,而 CD44 阴 性。结论 本实验方法可成功培养出肾微血管内皮细胞 ,且后者表达 CD31 、CD34 细胞表型。 【关键词】微血管 ; 内皮细胞; 肾; 细胞表型 中图分类号: Q25 文献标识码 : B The Study on Culturing and Facial Type of Renal Microvascular I Endothelial Cell in Vitro LIU Xin-hui , ZHANG Xi- in , WANG Xiao-don . et al. The Children Hos ital A iliated to Suzhou Universit , q g g p ff y Suzhou 215003 , China 【Abstract 】 Ob ective To ex lore the methods of culturin and identif the renal microvascular endothelial j p g y cell in vitro and stud it’ s facial t e in order to offer the ideal seedin cell for bone tissue en ineerin . Methods y yp g g g first , to ac uire the hi hl ured lomeruli b three ste s rade filtrated net ; next , to culture the microvascular en q g y p g y p g dothelial cell in vitro with the trans lant methods of isolated lomerali. moreover ,the renal microvascular endothelial p g cell were identified by immuno