浅谈免疫组化抗体克隆号问题.pdfVIP

2011年全国病理技术新进展研讨会地文汇编 广东地区 105． 浅谈免疫组化抗体克隆号的问题 罗陆侨I华寿余力自莎 南方医科大学珠江医院病理科 免疫组织化学技术在病理科的运用已经是非常成熟了，我院病理科是在80年代后期开 展免疫组化技术的。从最初的十几种检测项目到现在的一百多种检测项目，一抗的种类繁多， 各种来源和标记也々^眼花缭乱。晟初，我们技术员是根据病理医师诊断疾病的需要来选购 一抗的种类，选购时注意抗体的特异性、稀释度、修复方式、保质期、生产批号、阳性部位、 阳性对照和克隆来源。可是，最近，我们在实验和疾病诊断过程中发现，抗体的克隆号对我 们染色结果有影响。 众所周知，从抗体的克隆来源来看，抗体有单克隆抗体和多克隆抗体之分。一般来说， 多克隆抗体能够提供较强的阳性表达，但单克隆抗体的背景清晰。只要注意其特点，2种抗 体都可以有效地利用。但是．单克隆抗体就存在克隆系(号)的问题，就是说同一种抗体， 因为克隆系(号)的不同，所标记物也会有所不同。我们发现CK高分子(CK朋)就是一 个很特别的例子nc醐的克隆号有两种：34J3E12和AE3。这两种克隆号的抗体在鳞状上 皮和鳞状细胞癌中都阳性(见图1)。 ’，垮∥、i0≯{≥尹§一。、 ≯j’1。一∥誊专。， 3- ； ． ； 圈1I舌鲭状细胞癌HE染色 圈1．2舌鳞状细胞龠中AE3箍色 圈1．3舌鳞状细胞癌中341BEl2染 (20X) 阳性(20X) 色阳性(20X) 羲雾缪≯i1。：≯汽1 菇誊一，，．一’i。 、 鬻o：：’≯。。?。：_ (，， 蟛夕≯，1 。j ：置■√ 黧 圈2I前列腺腺癌HE染色(20X) 罔2,3前列腺臆癌AE3染色 圈2．2前列腺腺确34pEl2船色 (20X) 我们发现在前列腺腺癌和肾脏嗜铬细胞腺瘤中，这两种克隆号是有明显的差别。首先，是前 列腺腺癌(见图2)。 塑j!芦嗣i”．。． ’{》∥差震．萋釜：誓j 麓寨≤]霹 圈3,2肾脏嘈铬细胞腺窟AD 圈2．4前列腺腺癌cK染色圈3,1肾脏嗜铬细胞腺癌34BEl2染 (20X) 色阴性(20)【) 染色阳性(2皑) 良性前列腺组织作34BEl2标记只有基底细胞着色，分泌细胞和问质细胞均不着色，因此 图2,2能清楚显示正常前列腺腺泡周围完整的基底细胞层。由于基底细胞消失是诊断前列腺 腺癌的重要形态学依据，而HE染色中判断基底细胞是否存在十分困难，因此基底细胞标记 就成为前列腺良恶性鉴别诊断的重要手段之一。但是图2．3中AE3在前列腺腺癌中没办法特 异性识别腺泡周围完整的基底细胞层，它的染色和CK一样，广泛识别腺上皮。 其次，我们还在肾脏嗜铬细胞腺瘤中发现34距12和AE3的区别(见图3)，肾脏嗜铬 细胞腺瘤34pEl2阴性．而AE3阳性。AE3阳性有助于肾脏嗜铬细胞腺瘤的辅助诊断。 从上面两个例子可阻看出，抗体的克隆号对疾病的诊断有一定的影响．CK／H是比较特 殊的倒于。并不是所有抗体都会因为克隆号的不同而影响染色结果，例如S-100蛋白，克隆 号有15E2E2、PIov、4C49等，但它们的染色结果没有太多的区别。 通过对免疫组化克隆号的讨论，我们平时在选购抗体、