来源于Escherichiacoli的高比活植酸酶基因的高效表达.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # %’ (! ) ( # 年 月 !$ # !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 *+,-+./ !$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 来源于 !#$%’#$’( #)*’ 的高比活植酸酶基因的高效表达 # # # # # ! ! 罗会颖 姚 斌 袁铁铮 王亚茹 史秀云 伍宁丰 范云六 # ! （中国农业科学院饲料研究所，北京 #4#； 中国农业科学院生物技术研究所，北京 #4#） 摘 要 高效表达高比活植酸酶是进一步提高植酸酶发酵效价、降低植酸酶生产成本的一个有效途径。对源于 的高比活植酸酶基因 ，按照毕赤酵母（ ）密码子的偏爱进行了密码子优化改造。该 30%*#0#+ 0(,# +445 6#0#+ 4 +/(*# 改造后的基因 按正确的阅读框架融合到毕赤酵母表达载体 上的 因子信号肽编码序列 端，通过电 +44517 ADEF3 1 0G ! 击转化得到重组转化子。对重组毕赤酵母的H-CI8., ?’CC,J 分析证实植酸酶基因已整合到酵母基因组中，并确定 了整合基因的拷贝数。).CI8., ?’CC,J 分析证实植酸酶基因得到了正常转录。HKH1D6L 分析和表达产物的研究 表明，植酸酶得到了高效分泌表达，在9M 发酵罐中植酸酶蛋白表达量达到! N9=JO=M 发酵液，酶活性（发酵效价）达 到 5 发酵液以上，大大高于目前报道的各种植酸酶基因工程菌株的发酵效价。 2 N9 P # EQO=M 关键词 高比活植酸酶，基因改造，毕赤酵母，高效表达 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） R4#$ 6 #105# !$ #12412 植酸酶（肌醇六磷酸酶）是能够将植酸（肌醇六 蛋白表达量相当的情况下大幅度地提高其发酵效 磷酸）分解为肌醇和无机磷的一类酶的总称。植酸 价，是进一步降低植酸酶生产成本的最有效的 是谷物、豆类及油料等作物中磷的主要贮存形式，占 途径。 ［］ ［］ # 来源于 2 总磷量的#4S T 44S 。单胃动物和人缺少分解植 3 ( 0(,# 的植酸酶 比活性为 0 N # P 酸的酶而不能利用该种形式的磷，为了满足动物正 5 ，是目前发现的比活性最高的植酸酶，比 # EQO=J