石杉碱甲对体外培养大鼠脊髓片前角运动神经元损伤的保护作用.pdfVIP

J New Clin 中国新药与临床杂志(Chin DrugsRem)，2005年12月，第24卷第12期 netcn cn 933 http：／／xyyl．chinajournalhttp：／／zgxyylczzperiodicals．coln E-mail：xyylc@ahyyxx．corn [文章编号]1007-7669(2005)12-0933-05 石杉碱甲对体外培养大鼠脊髓片前角运动神经元损伤的保护作用 刘卫刚，肖向建，李敏，马征，李春岩+ (河北医科大学第二医院神经内科，河北石家庄050000) [关键词]石衫碱甲；肌萎缩侧索硬化；脊髓；谷 生物碱有效单体，不仅是一种高效高选择性的中枢 氨酸；细胞培养；苏一羟天冬氨酸 乙酰胆碱酯酶抑制剂，而且还通过对抗谷氨酸引起 的兴奋毒性、抗氧化应激、抗细胞凋亡等途径，对细 [摘要] 目的：利用选择性运动神经元死亡的脊髓 胞产生保护，具有治疗多种神经退行性疾病的潜在 薄片培养模型，观察石杉碱甲对运动神经元的保护 作用”。本研究观察石杉碱甲对前角运动神经元 作用。方法：乳大鼠腰段脊髓组织薄片分为正常对 是否有保护作用，报道如下。 照组、模型组和石杉碱甲1。10，100阻mol·L“5 组。用倒置显微镜观察脊髓片形态变化，SMI·32免 材料与方法 疫组化染色对腹角d运动神经元记数，透射电镜观 察o【运动神经元的超微结构并测定培养液中乳酸 实验动物用8d龄SD乳鼠(购自河北医科大学实 验动物中心)。 脱氢酶(LDH)的含量。结果：石杉碱甲100斗mo】· L一组脊髓片在体外生长良好，形态与正常对照组相 仪器与试剂培养液[50％最小基础培养基(含 25mmol·L～N-2一羟乙基哌嗪．N7．2-乙磺酸) 近；石杉碱甲1，10Izmol·L。组脊髓片生长不良， 形态与模型组相近。与正常对照组相比，模型组脊 25．6 髓片前角s磷I一32阳性0l运动神经元数减少(P 6。4g·L“葡萄糖)；实验仪器为CO：培养箱、超净 0．05)，培养液中LDH含量增加(P0．05)。与模 型组相比，石杉碱甲100p,mol·L。组脊髓片前角d 拿大GENEQ公司)、倒置显微镜、普通显微镜及分 运动神经元数增加(P0．05)，胞浆内空泡明显减 光光度计；石杉碱甲纯品(纯度98％，中国科学 少，培养液中LDH含量减低(P0．05)。结论：高 浓度石杉碱甲能改善乳大鼠脊髓片前角n运动神 院上海药物研究所提供)。苏-羟天冬氨酸购自Sig— ma公司；组化试剂一抗为小鼠抗非磷酸化神经丝蛋 经元生长，减少其空泡形成及死亡，并降低LDH的 释放。 白单克隆抗体(SMI一32)购自Stemberger 根酶标记链酶卵白素(SABC)购自北京中山化学试 [中图分类号]R744．8 剂公司，二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒购自北京 [文献标识码]A 中山化学试剂公司，乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒 l