知母组织培养无性系建立研究.pdfVIP

江苏农业科学 2011年第 1期 宋 娜，刘 阁，银帮巧，等．知母组织培养无性系建立研究[J]．江苏农业科学，2011(1)：70—71 知母组织培养无性系建立研究 宋 娜，刘 阁，银帮巧 ，徐 娜 ，姜长阳 (辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连 116029) 摘要：为保护知母野生资源和为生产栽培提供大量种苗，以知母的根茎为外植体，进行了生长点萌发、芽分化、试 管苗生根培养与试管苗移栽研究，成功地建立了知母组织培养无性微繁体系。结果表明：White+6一BA0．1mg／L+ IAA0．3me／L是知母根茎生长点萌发生长的理想培养基；MS+6一BA1．0—1．5mg／L+NAA0．2mg／L是根茎萌发芽 分化培养的理想培养基；1／2MS+NAA0．1mg／L+IAA0．2～0．3mg／L是分化芽生根培养的理想培养基。试管苗移栽 生长整齐而旺盛。 关键词：知母 ；组织培养；无性系 中图分类号：$567．239．043 文献标志码 ：A 文章编号：1002—1302(2011)01—0070—02 知母(Anemarrhell~asphodeloides)又称兔子油草 ，属于百 1．2．2 组织培养 以LS、B 、White、MS、1／2MS为基本培养 合科知母属的多年生草本植物 ，生长于山坡、草地、沙地和向 基，附加不同浓度的细胞分裂素 6一BA和生长素 IAA、NAA、 阳丘陵等环境中，在我国华北、华东、东北、陕西、甘肃等地均 IBA。愈伤组织诱导、不定芽的分化培养基加蔗糖30 L，生 有分布 。知母的根茎含有知母苷、知母皂苷和黄酮等多 根培养基加蔗糖 15g／L。固体培养基 的胨 力强度为 种药用成分，是重要的药用植物，具有清热解毒、滋阴润燥等 200g／ca ，培养基 pH值为 6．0，培养温度为 26℃，光照 功效，能治高热烦渴、肺热咳嗽、骨蒸潮热、虚烦不眠、消渴、遗 12h／d，光照度2500lx。 精、盗汗等疾病 。由于知母具有多种重要的药用价值，人 1．2．3 试验设计 们每年都要进行大量的采集，这使本来分布与数量都较少的 1．2．3．1 不同培养基对根茎生长点萌发的影响 在超净工 野生知母资源变得更加稀少，在辽宁南部地区，由于一些民问 作台上，把无菌根茎用解剖刀切成长 0．3em左右的根茎段 药工长期采挖，导致野生知母几乎绝迹，而药用市场的需求量 后，接种到以Ls、B、MS、1／2MS和White为基本培养基并附 却不断增加，为此，有必要进行知母人工栽培 ，但因种子和野 加6一BA0．1mg／L+IAA0．3mg／L的培养基上 ，放到恒温培 生植株都很少，限制了知母的人工栽培。为满足人工栽培对 养箱中，进行根茎生长点萌发暗培养。试验重复 3次 ，每种处 种苗的需求 ，特开展知母组织培养离体快繁研究。 理接种 100个根茎段 。 1．2．3．2 不同激素配 比对芽分化的影响 把黄色的生长点 1 材料与方法 萌发芽从根茎切下，接种到以MS为基本培养基并附加不同 1．1 供试材料 浓度的细胞分裂素 6一BA和不同浓度的生长素 IBA和NAA 知母根茎材料采集于大连旅顺英歌石山山坡。 的培养基上，进行芽分化培养。每种处理接种 20个萌发芽， 1．2 试验方法 试验重复 3次。芽分化培养连续继代4代。 1．2．1 材料收集与处理 8月份在山坡上选择生长非常旺 1．2．3．3 不同生长素配比对分化芽生根的影响 把继代培 盛的知母植株，做好标记。翌年4月末，将标记植株地块浇灌 养的分化芽丛切成单芽后，接种到 1／2MS为基本培养基并附 浓度为4mg／L的青霉素溶液，24h后将