SIAH2与Bcl-2在乳腺癌中的表达及相关性的研究.pdf

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………1 英文论著摘要……………………………………………………………………4 二、英文缩略语………………………………………………………………………8 三、论文 舀订。言………………………………………………………………………………9 HU舀………………………………………………………………………………y 材料与方法………………………………………………………………………11 实验结果…………………………………………………………………………14 讨论………………………………………………………………………………19 结论………………………………………………………………………………21 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………22 五、参考文献…………………………………………………………………………23 六、附录 综述………………………………………………………………………………26 在学期间科研成绩………………………………………………………………35 致{射………………………………………………………………………………36 个人简介…………………………………………………………………………37 ·中文论著摘要· SIAH2与Bcl．2在乳腺癌中的表达及相关性研究 刖 声 乳腺癌是女性一种常见的恶性肿瘤，已成为女性肿瘤患者死亡的主要原因。 乳腺癌的发生经历了以下几个阶段：正常导管上皮-÷普通型导管上皮增生_不典 型导管上皮增生一导管原位癌_浸润性导管癌，探讨与乳腺癌动态发展过程相关 基因的改变对治疗乳腺癌具有重要意义。 2)蛋白具有E3泛素连接酶的活性，可调节 SIAH2(Seven．In．AbsentiaHomolog 等。近来发现SIAH2可作为一种重要的肿瘤因子发挥生物学作用，SIAH2在有增 殖能力的细胞中表达(正常和瘤细胞)，如宫颈癌细胞，乳腺癌细胞，人胚肾细胞 及结直肠腺瘤组织等，而在不增殖的细胞中表达缺失。研究报导抑制SIAH2的功 能后能够阻断ERK信号通路，抑制软琼脂中胰腺癌细胞的自主生长和裸鼠体内胰 腺肿瘤的形成，最近研究发现SIAH2在几乎所有类型肺癌组织中均有表达，并且 随着肺癌分化程度的降低SIAH2的表达显著增加，而在正常肺组织中几乎不表达。 Bcl．2(B．cell gene)是程序性细胞死亡的关键调节因子，它 lymphoma／leukemia-2 既能够与自身形成同源二聚体，也可以与Bcl．2家族其他蛋白形成异源二聚体。 Bax的构象改变，并且能够阻止Bax从胞浆到线粒体膜的易位，从而抑制细胞凋 亡。 最近有研究发现抑制SIAH2的功能可以使其底物蛋白Spry2水平上调从而抑 研究目的旨在探讨乳腺组织及细胞系中SIAH2和Bcl．2的表达情况及与临床病理 学参数的意义，探讨在乳腺癌细胞中干扰SIAH2的功能后Bcl．2表达的变化。 材料与方法 l、材料 180例乳腺组织标本(包括33例『F常乳腺组织，28例乳腺不典型增生组织， 39例乳腺导管原位癌组织和80例乳腺浸润性导管癌组织)，均取自中国医科大学 第一临床学院2007．2009年肿瘤外科手术切除的标本，所有患者术前均未接受放、 化疗。标本经4％中性甲醛固定，石蜡包埋，HE常规染色后明确诊断。其中部分 癌组织和J下常乳腺组织离体后立即放入液氮后．70。C冰箱保存备用。 条件下培养。 2、主要试剂和来源 SIAH2鼠单克隆抗体，SIAH2siRNA，Bcl．2鼠单克隆抗体均购自美国Santa Cruz公司。SP免疫组化试剂盒和DAB酶底物显色试剂盒购自福州迈新生物技术 开发公司。 3、方法 (1)免疫组织化学染色及结果判定 标本固定，石蜡包埋，制成49m连续切片，采用链菌素抗生物素蛋白．过氧化 阴性对照。结果判定：SIAH2以细胞核中出现棕黄色颗粒为阳性显色，Bcl一2以细 胞质中出现棕黄色颗粒为阳性显色。高倍视野(x400)下选阳性信号