解毒补肾法对老年性痴呆模型大鼠抗炎作用的实验的研究.pdfVIP

中文摘要 目的 从毒侵脑府、脑府受损，肾精亏虚、脑失所养理论探讨AD的发病机理， 遵循中医“虚则补之，实则泻之“标本兼治”的治疗原则，提出解毒补 肾法治疗AD。建立D-gal致亚急性衰老模型与hD：¨，海马双侧定位注射 制备复合型AD大鼠模型。通过观察解毒补肾法对AD模型大鼠学习记忆能 力、脑组织病理形态、细胞因子(IL-1 量、NF-，cB及iNOS阳性表达等相关指标的影响，探讨解毒补肾法对AD 模型大鼠的治疗效果和作用机理，为中医药治疗AD提供理论和实验依据。 方法 将8月龄sD雄性大鼠9o只，随机分为6组，即正常组、假手术组、 模型组、脑复康治疗组(简称脑复康组)、千层塔合剂低剂量组(简称千 低组)、千层塔合剂高剂量组(简称千高组)，每组15只。大鼠适应性喂 养一周后，正常组不予处理，假手术组颈部皮下注射生理盐水，模型组、 脑复康组、千高组、千低组大鼠颈部皮下注射D-gal致大鼠亚急性衰老， 6周后，大鼠海马双侧定位注射AD：，埘制备复合型AD大鼠模型。手术3 天后，各手术组大鼠经相应药物灌胃治疗4周，正常组常规喂养。治疗4 周后，各组大鼠进行水迷宫行为学试验，光镜、电镜下观察各组大鼠海马 组织病理形态学改变，放射免疫方法检测各组大鼠海马组织IL-1D、 法检测各组大鼠海马组织NF-1cB、iNOS的阳性表达。 结果 1．行为学实验，各组大鼠定位航行实验的平均潜伏期、20％、40％区域百 分比，空间探索实验的潜伏期、象限百分比、跨越原平台位置的次数结果， 正常组与假手术组比较差异无统计学意义(P0．05)；模型组与正常组比 较有显著性差异(P0．01)，表明该造模方法能显著降低AD模型大鼠的 学习记忆能力；千高组与模型组比较有显著性差异(Po．01)，表明千高 组能显著改善AD模型大鼠学--j记忆能力；千低组与脑复康组比较差异无 表明千高组对于AD大鼠的学--j记忆能力改善效果优于脑复康组。表明此 AD大鼠模型是成功的，解毒补肾法可显著改善AD模型大鼠的学--j记忆能 力，其疗效优于脑复康组。 2．电镜、光镜检测，病理形态上，模型组主要表现为大鼠海马神经元变 性坏死，颗粒空泡变性、核固缩、胞膜、核膜界限不清。可见线粒体水肿， 线粒体体积明显增大，基质变均匀、颜色变浅淡，基质内出现多个亮区或 全部变空，嵴变短变少甚至很难见到。内质网扩张囊泡变。突触数目明显 减少，肿胀变性。千高组与模型组比较有显著改善，无神经元凋亡，神经 元胞核清晰，细胞间连接较为紧密，胞浆中可见较为丰富的线粒体，仅轻 微水肿，无颗粒空泡样变性。千低组与脑复康组病理形态较模型组有改善， 但不如千高组改善明显。表明解毒补肾法具有显著改善AD模型大鼠海马 组织病理改变的作用。 3．放免法检测大鼠海马组织细胞因子(IL一1p、IL-6、TNF-仅)的含量， 结果正常组与假手术组比较差异无统计学意义(Po．05)；模型组含量较 D、IL一6、 正常组与假手术组明显升高(P0．01)，各治疗组均能降低IL-1 组比较有显著性差异(P0．01)，表明解毒补肾法可显著降低AD模型大 鼠细胞因子IL-1 症反应。 4． ELISA法检测大鼠血清CRP含量，结果正常组与假手术组比较差异无 统计学意义(Po．05)；模型组含量较正常组与假手术组明显升高(P o．01)，治疗各组均能降低CRP含量，千高组CRP含量最接近正常组，与 模型组比较有显著性差异(P0．01)，与脑复康组比较有显著性差异(P 肾法可显著降低AD模型大鼠CRP的含量。 5．免疫组化法检测AD模型大鼠海马组织NF-1cB、iNOS的阳性表达，结 Ⅱ 果模型组光镜下见棕黄色颗粒最多，说明模型组NF-KB、iNOS阳性表达 最强，治疗各组与模型组比较棕黄色颗粒均有减少，说明各治疗组均能抑 制NF-KB、ilqOS阳性表达。治疗组中千高组的棕黄色颗粒明显减少，脑 复康组与千低组的阳性表达与千高组比较又明显要多，千低组与脑复康组 B、iNOS 比较差异不明显。表明解毒补肾法可抑制AD大鼠海马组织NF-K 的阳性表达。 结论 1．毒侵脑府、脑府受损，肾精亏虚、脑失所养是AD的基本病机，解毒补 肾法是治疗AD的有