脑星形细胞瘤磁共振波谱与肿瘤细胞的Ki-67、bcl-2相关性的研究.pdf

脑星形细胞瘤磁共振波谱与肿瘤细胞的Ki一67、 bcl．2相关性研究 硕士生姓名：苗 红 指导教师：宋福林 教授 专业名称：病理学与病理生理学 摘 要 背景与目的：脑星形细胞瘤是来源于神经上皮组织的常见的颅内肿 瘤，主要为肿瘤性星形细胞所构成。肿瘤级别和恶性程度的确定对治疗 方案的选择有重要的价值。以往对星形细胞瘤的诊断主要依据磁共振平 扫和增强检查，但对星形细胞瘤恶性度分级存在局限性。MR波谱(MR 原子核及其化合物进行分析的方法，是目前研究人体器官、组织代谢、 生化改变及化合物定量分析的惟一无损伤性方法。可以获得活体组织的 生化代谢信息。星形细胞瘤由于其组织学形态复杂，病理分级繁琐，免 疫表型差异较大，故其预后差异显著，难以判断，近年来研究表明，一 些基因改变和物质的表达和星形细胞瘤增殖活性、病理级别及患者预后 密切相关。Ki．67是目前已知的增殖抗原中最具增殖能力的代表指标。 bel．2是目前研究较为深入的凋亡抑制基因。为进一步明确星形细胞瘤 预后影响因素、指导临床治疗，本文目的：1、研究脑星形细胞瘤氢质 resonance 1 H—MRS)表现 子磁共振波谱(proton spectroscopy magnetic 及其临床意义；2、探讨脑星形细胞瘤的1H．MRS特点与其病理级别相 关性。3、探讨Ki．67和bcl．2在脑星形细胞瘤中的表达及其与病理级别 的相关性。4、探讨脑星形细胞瘤磁共振波谱与肿瘤细胞的bcl-2蛋白、 细胞核增殖抗原(Ki．67)蛋白表达的相关性。 材料及方法： 1．材料 搜集2006年1月至2009年12月沈阳军区总医院经临床手术及病理证 实的脑星形细胞瘤52例，年龄1O一77岁，平均38岁，男28例，女 24例。所有患者均行常规MR和1H．MRS检查。所有标本经中性4％福 尔马林液固定，石蜡包埋，选择典型病灶的石蜡块连续切片。 2．方法 2．1 MR设备及成像方法：磁共振检查采用GE MR／i丌Ⅵ1．5T Signa Plus超导型磁共振扫描仪。用标准头线圈作发射和接收线圈。 Hispeed 患者取仰卧位，所有患者均行常规TJ加权像、T2加权像、增强扫描和 多体素质子波谱扫描。常规增强TIWI，静脉团注GD．DTPA，剂量： 0．2mmol／kg体重。在增强扫描前行多体素波谱扫描，点分辨波谱 (PRESS)序列，对肿瘤区、对侧正常脑组织区进行测量。检测不同区 域代谢物变化。 2．2免疫组化方法：应用免疫组化染色技术检测正常脑组织、星形细 胞瘤中Ki．67和bel．2蛋白的表达情况。分析肿瘤实质内NAA／Cho、 关性分析。 采用链霉菌抗生物素蛋白一氧化物酶连接法 型)；鼠抗人Ki．67单克隆抗体(即用型)均购自北京中山生物技术有 限公司。石蜡切片常规脱蜡、水化，选择典型病灶的石蜡块连续切片。 继以免疫组化试剂盒进行检测，操作步骤按说明书进行。 3．结果判定 3．1免疫组化判定标准：bcl．2阳性细胞以细胞浆出现棕黄色颗粒为 标准，Ki一67以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性细胞，根据阳性细胞所 占百分比和染色强度分为3级：阳性细胞数三25％，着浅色棕色为(+)； 阳性细胞数≥75％，着深棕色为(+++)；阳性细胞数及显色强度介于 二者之间为(++)； 3．2统计分析：数据统计应用SPSS11．5软件，采用X2检验、t检验 和Spearman等级相关分析。 结果： 匀或不均匀信号，增强扫描为明显及部分强化。肌酸(Cr)轻度下降， 于低级别星形细胞瘤和对照组，NAA／Cho、NAA／Cr低于低级别星形细 l6)。 别为．O．632，．0．798)，Cho／Cr比值存在正相关关系(相关系数rS为0．8 2．免