多聚唾液酸对L天冬酰胺酶的修饰及修饰酶特性研究.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’()*!+(*# 年 月 $%%% !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( ,-) $%%% - 12 . !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 多聚唾液酸对 天冬酰胺酶的修饰及修饰酶特性研究 ! 王颖达 郭 丽 钱世钧 孟广震 张树政 （中国科学院微生物研究所酶学研究室 北京 ） !%%%2% 关键词 天冬酰胺酶，多聚唾液酸，免疫原性，抗原性，蛋白酶水解 30 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） 42! 5 !%%%01%!$%%%%#0%6!0%# ［］ 6 来源于大肠杆菌（ ）的 天冬酰胺酶是治疗淋巴 多聚唾液酸含量的测定 ： 样品加入 340(,# 30 #*$*# %X!73 !X/ 性白血病和恶性淋巴肿瘤的有效酶制剂，已应用于临床。该 和 试剂，沸水浴中煮 ，冷水浴中冷却 73T R $73W0 !67?C $ 酶与其他蛋白质类药物一样，在临床应用中存在两个常见问 后，加入 丁酸丁酯 正丁醇（ ），剧烈振荡后，放置 #73 Y 26Y!6 题：一是酶制剂在体内易被降解，导致半衰期短；二是免疫原 ，取有机相于 测定吸收值。 !%7?C 62%C7 性。为了解决上述问题，人们用亲水性的大分子如血清蛋 #*$*$ 多聚唾液酸的纯化：收集 340(,#F02的发酵液，加 白、右旋糖苷和单甲氧基聚乙二醇（ ）对该酶进行修饰。 入（ ） 至 饱和度，菌体离心沉淀后，取上清液超 789: +T DR 6%; # $ # ［］ 其中 !修饰后的 天冬酰胺酶的抗原抗体结合能力 滤浓缩；于浓缩液中加入（ ） 至 饱和度，室温放 789: 30 +T DR 6%;