安卡鸡TLR4基因外显子2多态性及其与经济性状的关联分析.pdfVIP

20]{霉 蓊 《7卷 甍5期 GeneticsandBreeding ·避 瀚 安卡鸡 TLR4基因外显子 2多态性及其 与经济性状的关联分析 刘 艳 ’，常国斌 ，包文斌 ’，王克华 ，张学余 ，陈国宏 ’ (1．扬州大学动物科 学与技术学院，江苏扬州 225009；2．中国农业科学院家禽研 究所，江苏扬州 225003) 摘 要：研究采用PCR-SSCP对安卡鸡 TLR4基因外显子 2多态性进行检测，并分析其多态性对经济性状的影 响。结果表明：安卡鸡 TLR4基因存在AA、AB和BB3种基因型，基 因型频率分别为0．3143、o．4000和o．2857，等位 基 因A、B的频率分别为0．5143和0．4857。x：适合性检验表明，安卡鸡 TLR4基因外显子2等位基因的分布处于 Hardy—Weinberg平衡状 态。序列分析结果显示，TLR4基 因外显子 2的 114bp和 142bp处各有 1个 G／A突变， G114A为沉默突变，没有引起氨基酸改变，G142A为错义突变，氨基酸由谷氨酸转变为赖氨酸。分析这 3种基 因型 与安卡鸡一些重要经济性状间的关联性，表明，3种基因型个体间的生长发育性状、屠宰性状 以及常规肉质等重要 经济指标差异不显著，安卡鸡 TLR4基因外显子2对重要经济性状没有显著的影响。 关键词 ：TLR4基因；抗性基因；经济性状；鸡 中图分类号 ：$831．2 文献标识码：A 文章编号 ：0258—7033(2011)05—0001—04 Toll—like受体 (toll—likereceptors，TLRs)发现源 苷酸多态性进行检测 ，了解 TLR4等位基因在群体 于果蝇 Toll蛋 白，它除参与调控胚胎果蝇背腹侧极 中的分布情况 ，并分析其多态性对生长发育性状 、屠 性形成外 ，直接介导果蝇对微生物感染产生天然 (固 宰及常规 肉质等一些重要经济性状 的影响 ，以期为 有)免疫反应 。自报道 TLRs至今 ，已在哺乳动物 (人 今后制订抗病育种方案提供指导和参考依据。 和小 鼠)中发现 TLRs的 13种成员 TLR1～13，在人 1 材料与方法 类和多种动物病原菌 的PAMP(病原相关分子模式) 识别中起着关键作用 1【1。 1．1 实验材料与性状测定 实验用安卡鸡 70羽采 Toll—like受体在机体激活 固有免疫和诱导适应 自中国农业科学院家禽研究所 ，公、母基本各半，按 性免疫 的防御机制 ，特别是在先天性固有免疫中起 常规方法进行饲养管理 ，每 2周测定 1次体重 。饲养 着重要作用 。在TLRs庞大家族中，人们的兴趣主要 至 l2周龄 ，按全 国家禽育种委员会 1984年颁布的 集 中在TLR4研究上 ，它是细菌脂多糖 LPS识别的 “家禽生产性能与计算方法”进行测定体尺和屠宰性 主要受体 ，并识别许多革兰 氏阴性病原菌、衣原体、 能，并测定常规肉质。 螺旋体和病毒等病原微生物，其受体基因的遗传差 1．2 DNA提取 翅静脉采血 0．4mL，肝素钠抗凝 ， 异可造成机体对多种病原体抵抗力不一 ]。 加裂解液 4mL，用酚一氯仿抽提法提取基因组DNA， 目前 国内、外关于鸡 TLR4基因对疾病的抗性 ／ 溶于 TE中，4℃冷藏备用 。 易感性 的研究相对较少 ，而且鸡 TLR4基 因对重要 1．3 引物设计 根据 GenBank鸡 TLR4基因 (登录 经济性状的遗传效应还不甚清楚。安卡鸡原产于以 号 AY064697)外显子 2序列设计引物，上游引物序列 色列 ，为速生型黄羽肉鸡 ，四系配套 。具有适应性 F：5-ATcTGccAcAGGTcATcc一3，下游弓I物序歹0R： 强 、耐应激 、生长速度快 、饲料报酬高等特 点。本实