氧化应激对人胰腺导管上皮细胞增殖及其凋亡的影响.pdfVIP

氧化应激对人胰腺导管上皮细胞增殖及凋亡的影响 戴欣欣杨立新郝建宇 首都医科大学附属北京朝阳医院消化内科 目的利用过氧化氢(H202)作为活性氧来源，建立人胰腺导管上皮细胞氧化应激损伤模型， 研究氧化应激对人胰腺导管上皮细胞增殖及凋亡的影响。 方法①常规培养人胰腺导管上皮细胞(hTERT-HPNE cell，检测各组细胞SOD活性、 3001m30FL和时间梯度oh、6h、12h、24h、48h作用于hTERT-HPNE 比色法检测细胞OD值，绘制细胞生长曲线，计算细胞存活率；PI单染色法检测细胞周期，计算细 胞增殖指数(PI’)。④研究H202对人胰腺导管上皮细胞凋亡的影响：利用倒置相差显微镜观察细 胞数量及形态学变化；PI单染色法检测细胞凋亡情况。 cell 结果①建立人胰腺导管上皮细胞氧化应激损伤模型：H202处理hTERT-HPNE6h各H202 H202浓度的升高和作用时间的延长，各H202组细胞内活性氧水平继续升高，细胞上清液SOD活 性逐渐减弱，GSH．PX浓度继续降低，MDA浓度逐渐升高，细胞裂解液SOD活性亦逐渐减弱， MDA浓度亦逐渐升高：48h上述变化最为显著。②H202对人胰腺导管上皮细胞增殖的影响：H202 cell 处理hTERT-I-IPNE 6h仅H202 出现抑制细胞增殖作用。12h仅H202 存活率明显下降(56．90士29．91)％；P0．01，即其抑制细胞增殖作用加强。24h H20225、501xmoFL 组细胞OD值、细胞存活率及PI’均保持逐渐升高趋势，但差异尚无统计学意义(PO．05)，细胞生 长曲线稍高于空白对照组，即可能出现较弱的促进细胞增殖作用；而H202100、200、3009moFL 组细胞OD值均明显降低(0．493i-0．01 抑制细胞增殖。48h 显升高(127．39-j：3．99)％：P0．01，H20225、501．anol／L组细胞生长曲线均位于空白对照组上方， PI’均明显升高(44．20-J：1．75)％，(40．50 100、200、 4：1．82)％；P0．01，即均促进细胞增殖；而H202 长曲线均位于空白对照组下方，细胞存活率均明显下降(84．7钍3．08)％，(58．2哨．10)％， ·】92· P0．01，即其抑制细胞增殖作用加强。③H202对人胰腺导管上皮细胞凋亡的影响：H202处理 hTERT-HPNEcell Oh、6h、12h、24h、48h时于倒置相差显微镜下观察，H202 25、50tunoFL组细胞 数量逐渐增加，细胞形态未见明显变化；H202 48h时部分细胞出现皱缩现象，未见细胞膜起泡、凋亡小体形成等改变；各H202组DNA直方图中 均未见G0／GI期细胞比例降低且于GI峰前出现凋亡小峰的表现。 24h、48h作用于人胰腺导管上皮细胞，建立氧化应激损伤模型。②低浓度H202促进人胰腺导管上 皮细胞增殖，高浓度H202抑制其增殖，呈时效和量效关系。③H202对人胰腺导管上皮细胞凋亡的 影响不明显。 关键词氧化应激；过氧化氢：人胰腺导管上皮细胞：增殖；凋亡 急性胰腺炎并发应激性溃疡出血的临床观察与护理 杜丽华荣加 目的探讨急性胰腺炎(AP)并发应激性溃疡出血的临床观察要点和护理措施。 方法回顾性分析2005年3月．2010年6月我院收治的急性胰腺炎并发应激性溃疡出血的患者 32例。 结果全组中死亡4例，病死率12．5％。 结论老年AP患者，特别是合并胆管结石梗阻、胰腺脓肿、假性胰腺囊肿者容易并发应激性 溃疡出血，发病后7周内是出血高发期，做好护理评估及动态观察病情最为关键，及时有效的抗休 克措施是抢救配合的护