猪细小病毒VP区遗传元件在病毒复制效率中发挥关键作用.pdfVIP

专论与综述 猪细小病娄VP区遗传元件在病娄复制效率中发挥关键作用 逢春华 ，生成选 (1．山东省青岛机场出入境检验检疫局，青岛 266000；2．青岛出入境检验检疫局。青岛 266000) DOI：10．3969~．ISSN．1671—6027．2011．08．004 猪细小病毒 (PPV)是引起猪繁殖障碍疾病的非 二个片段 (CR2)相应地包含VP区的核心部分。包 外膜2O面体病毒 ，和其他细小病毒的亲缘病毒类 括三个非同义中2个的替换(NADL一2到Kresse毒 似，PPV非结构蛋白NS1与基因组复制、转录调控 株 D378G和H383Q；VP2编号)已经在牛睾丸细胞 和细胞毒性相关，而NS2参与衣壳的组装和转运。 上被证实是异形体的决定子。CR3内的第3个残基 结构蛋白VP1和VP2按 1：10的比例形成25nm直 ($436P)最近被证实与同向性无关。l4个不同的嵌 径的衣壳。关于控制细小病毒嗜性的机制了解较 合体被构建出来，嵌合体被命名为X—YnRxy，X代 少。对于PPV，在细胞表面的permissivity没有被检 表骨架，Yn代表其他毒株的插入片段，Rxy代表重 测过，因为研究证实病毒可以通过类似于吞噬作用 复)，并转染sT细胞。利用转染细胞上清感染细胞 的非特异性方式进人细胞。两株PPV(NADL一2和 产生病毒并用 IFA鉴别，同时利用基因组中重复序 Kresse)的基 因组 只有 l3个碱基和一段位于 列 PCR片段测序鉴定。这些病毒颗粒以2ffu的 NADL一2毒株右侧发夹结构处的 127核苷酸的非 MOI感染sT细胞用来比较复制效率。 编码重复序列不同，然而它们在猪源和牛源细胞上 1 VP基因元件和重复支配复制效率 的复制效率不同。其他细小病毒株如MVM、CPV和 利用感染后不同时间段收获细胞所做的qRT— H1都具有不同的重复序列，这些重复序列的作用 PCR检测病毒基因组的复制水平，检测结果以病毒 始终存在争议。 基因组拷贝载量的对数值(GCE)／细胞起初的GCE／ 有趣的是，在PPV污染的胰脂肪酶提取物中， 感染后8h的细胞来表示。Kresse早期的基因组复 序列分析表明北美分离株与欧洲、巴西和中国分离 制水平显著低于 NADL一2，引人CR2N的Kresse毒 株比较，差异性很小。虽然没有发现Kresse毒株的 株嫩显著提高了增值效率，甚至达到NADL一2的增 VP蛋白c末端置换(3869到4546nt)，但几乎NS 殖水平(K—N2，K—N2Rn，K—N23，K—N23Rn)，而除 的全长序列揭示污染物包含了两个序列的置换 非重复序列也被置换，否则倒置的构建 (N—K2)不 (NADL一2，c537和 a1971；Kresse，a405，g1533和 能把 NADL一2的复制水平降低到kresse的水平(N— c1668)。2009年，NS区域一个单非同义替换被发现 K2Rk)。N—K23和 N—K23Rk在早期的复制中表现 (a875g；NS1编号)，但这些变化的重要性 目前还不 正常但是在感染后 10～20h出现减弱。除非NADL- 清楚。 2的重复序列也被引人，否则被引入 Kresse毒株的 为了检测 sT细胞上增殖的NADL一2和Kresse CR3N通常会进一步的增强复制 (K—N23andK— 毒株有哪些遗传元件影响复制效率，一系列嵌合体 N23Rn．versusK—N2 and K—N2Rn；K—N3 versus 从感染性克隆中被构建出来 ，一个无缝克隆体系被 Kresse)(K—N3RnversusK—N3)。置换kresse毒株的 用于右