项目6疫苗生产技术.pptVIP

教学安排 1. 员工培训 由老师讲解病毒疫苗生产的理论基础及应用范围。 分配实操任务：病毒疫苗(用动物病毒模拟)的生产。 2. 学生模拟组建运营一个病毒疫苗生产企业，撰写计划书(在理论教学期间完成)。 市场部：病毒疫苗的种类和用途，市场状况，选择生产的细菌疫苗品种，做市场销售预测。 技术部：确定病毒疫苗生产的工艺流程及工艺参数，编制生产操作规程，确定生产车间的布局。 品控部：制定所生产的病毒疫苗质量标准，生产取样分析操作规程，质量检测标准和操作规程。 总经理：协调监督各部工作，最后拿出完整的计划书。 3. 计划书实施。 计划书要先经过老师的审核，然后实施。 实施过程中考核操作技能。 实施后及时进行实训报告的撰写也总结。 病毒疫苗的一般制造方法 　 一　病毒类疫苗的制造方法 1　毒种的选择与减毒 毒株须具备的条件： （1）持有特定的抗原性； （2）有典型的形态和感染特定组织的特性，并能保持其生物学特性； （3）易在特定组织中大量繁殖； （4）不产生神经毒素或能引起机体损害的其它毒素； （5）如制备活疫苗，繁殖过程中无恢复原致病性的现象； （6）未被其它病毒污染。 2　病毒的繁殖 （1）活体动物培养 （2）鸡胚培养 （3）组织培养 （4）细胞培养； 细胞培养时需要控制： ①　常用的维持液和生长液 　　需要氨基酸、辅酶、维生素、葡萄糖和无机盐等。 ② 培养条件控制 a pH值：7.0±0.2； b CO2提供：通过保持环境CO2分压5%，控制pH。 c 氧的提供：通氧； d 容器内壁洁净度控制：用硫酸－铬酸混合液洗涤，后用纯水冲洗； e 细菌污染控制：彻底灭菌，加入一定量抗生素； f 培养温度和时间控制：37±1℃，时间2－4天。 3　疫苗的灭活 　　用甲醛或酚溶液灭活。 　　动物组织对灭活效果有影响；灭活时间要合适。 4　疫苗纯化 　　细胞培养换液即可。 5　冻干 　　冻干的疫苗充氮或真空密封保存。 重要的病毒类疫苗生产工艺 一、甲型肝炎减毒活疫苗 历史： 绒猴肝内复制； 细胞培养未经纯化； 细胞培养经纯化。 二　乙型肝炎疫苗 　　HBsAg抗原具有较强的免疫原性，可制备疫苗，用酵母表达系统。 三　流行性乙型脑炎疫苗 　　11-15日龄地鼠肾经胰酶消化，用大立瓶6-8r/h培养3d，用生理盐水充分洗涤，加入维持液，接入毒株鼠脑悬液，待病变达+++，第一次收液。细胞良好，待病变达++++作第二次收液。收液作毒力滴定与无菌实验，加入福尔马林，22℃恒温灭活8d。 六　白喉类毒素 1　菌种及培养基 　　菌种：第8号菌株。 　　培养基：改良马丁培养基，保浦氏培养基，改良林氏培养基。 2　培养 　　多用深层培养。 温度　34－35℃ pH　　7.0－7.6 糖量　用麦芽糖 通气量　充足 氮源　补加谷氨酸 时间　50h左右 3　脱毒方法 （1）温度　越高越快，但超过40℃会降低抗原性，一般采用37－39 ℃ ； （2）pH值　越高越快，但碱性会降低抗原性，一般采用7.0－7.5； （3）甲醛浓度 越高越快，但过高会导致高甲醛残留，且增加注射疼痛。 作业： 1　简述病毒类疫苗制造方法。 2　如何生产甲型肝炎疫苗？ 3　如何生产脊髓灰质炎减毒活疫苗？ 4　如何生产流感疫苗？ 5 如何生产狂犬疫苗？ 6 如何生产乙肝疫苗？ * * 项目6：疫苗生产技术 任务2：病毒类疫苗的生产技术