遗传稳定型六六六、甲基对硫磷降解基因工程菌的构建及特性研究.pdfVIP

维普资讯 第29卷第 7期 Vo1．29．No．7 2008年7月 环 境 科 学 July，2008 ENVIR0NMENI’ALSCIENCE 遗传稳定型六六六、甲基对硫磷 降解基因工程菌的构 建及特性研究 陆鹏 ，洪源范 ，洪青 ，蒋新 ，李顺鹏 (1．南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室，南京 210095；2．中国科学院南京土壤研究所 土壤与农业可持续发展国家重点实验室，南京 210008) 摘要 ：通过转座子介导同源重组的方法 ，将 甲基对硫磷水解酶基 因mpd导人到六六六降解菌 BHC．A的染色体上 ，构建 了能同 时降解六六六和甲基对硫磷 的基因工程菌 BHC—A—mpd．对其生长特性和降解特性的研究表 明，工程菌在 LB培养基 中的生长 特性与原始菌株没有差别，生长至对数期 A 值都可达到 2．5；对六六六的降解特性和原始菌株相 同，可在10h内将 5mg／L的 六六六完全降解 ．mpd基因在 BHC．A．mpd中稳定表达 ，BHC—A—mpd可 以降解多种有机磷类农药 ．该基 因工程菌的构建为六六 六和甲基对硫磷复合污染环境的生物修复奠定了基础 ． 关键词：六六六 ；甲基对硫磷 ；生物降解 ；基因工程菌 中图分类号 ：X172 文献标识码 ：A 文章编号 ：0250．3301(2008)07—1973-04 ConstructionofaStableGeneticallyEngineeredM icroorganism forDegradingHCH M ethylParathion and ItsCharacteristics LUPeng，HONGYuan—fan，HONGQing～，JIANGXin，LIShun—peng (1．Key Laboratory ofMicrobiologicalEngineeringAgriculturalEnvironment，Ministry ofAgriculture，CollegeofLife Science，Nanjing AgriculturalUniversity，Nanjing210095，China；2．StateKeyLaboratoryofSoilandSustainableAgriculture，InstituteofSoilScience，Chinese AcademyofSciences，Nanjing210008，China) Abstract：A GEM designatedasBHC—A—mpd，capableofsimuhaneouslydegradingofmethylparathion(MP)andHCHwassuccessfully constructedbyrandominsertionofamethylparathionhydrolasegene(mpd)intochromosomeofaHCH—dergadingstrainBHC—Awiththemini— Tn—transposonsystem．Thergowth anddergading characteristicsofBHC—A—mpdwascomparedwith theoriginalstrainBHC—A，and theresult showedthattherewasnodifferenceinthistwoaspects，A600 ofBHC—A—m,a inLBmedium couldreach2．5inlogarithmicperiod，whichwas thesameasthatoftheoriginal strainBHC—A．BHC—A—mpd showedthesameHCH—dergadingabilityasBHC—A andcoulddergade5mg／Lof — HCH in