银（Ⅰ）与血清白蛋白的结合及其后续效应.pdfVIP

维普资讯 第 32卷第3期 江西师范大学学报 (自然科学版) V_n1．32No．3 2008年 6月 JOURNALOFJIANGXINORMALUNIVERSITY(NATURALSCIENCE) Jun．20o8 文章编号：1000-5862(2008}03．0253．O8 银 (工)与血清 白蛋 白的结合及其后续效应 宋 铮 ， 梁 宏2， 宋才生 (I．江西师范大学 化学化工学院，江西 南昌 330027；2．广西师范大学 化学化工学院，广西仕 541004) 摘要 ：等离子点pH(5．4)条件下，用平衡透析法和紫外光谱、荧光光谱、共振散射光谱研究了Ag(I)与人 血清白蛋白(bovineserllnlalbumin，简称BSA)的结合 ．Scatchard图分析表明，鲰(1)在 HSA或 BSA中有强弱 两类结合部位，通过计算机拟合获得结合的逐级稳定常数值．紫外扫描发现鲰(I)与HSA或BSA的结合 存在滞后效应 ，表明舨(I)与lISA或 BSA的结合可能诱导蛋白质构象发生缓慢变化(A～B)，测得并讨 论了这一构象变化的速度常数和活化参数 ．通过 (I)．1ISA和 Ag(1)BSA体系的紫外光谱，推测 鲰(I)与血清白蛋白中的硫结合形成直线型或近似直线型的配合物．利用荧光猝灭法计算出Ag(I) HSA和鲰 (1)．BSA体系的Stem-Volmer常数和双分子猝灭速率常数．共振散射光谱结果分析表明鲰 (I) 的结合可使白蛋白分子趋于聚集． 关键词 ：银(I)；血清白蛋白；平衡透析；后续效应；紫外光谱；荧光光谱；共振散射 中图分类号：0614．123 文献标识码 ：A 银广泛分布于 自然界，在地壳中含量为 1×10～，居地壳中元素丰度的第63位，海水中估计含量 1tc／L． 银不是生命必需的物质 ，但仍发现在各种生命组织中有痕量的银存在，如在牛的肝脏和胰腺中分别含银 0．0005％～0．001％．由于少量的银离子有消毒作用，因此成为医用药物，李时珍在 《本草纲 目》中已有用银 人药的记载llj．银对细菌等微生物的生长繁殖起毒害作用，Nageli将其称为微动效应 (oligidynamiceffect)．银 的微动活性较高，杀菌力也较强，因此人们早就用银器防止饮料变质，在外科手术中用银箔或或银片来处理 骨折 ¨2j．从近十年来的文献中发现，抗癌金属配合物中金属元素的选择范围由Pt(Ⅱ、IV)扩大到铂系(Ru、 Rh、Pd、Ir)再扩大到其它软酸金属例如Cu、Ag[21．金属离子与血清 白蛋白结合平衡 已有报道 ，但 由于银(I)易 水解，见光易分解 ¨3j，目前关于银(I)与血清 白蛋白的结合尚鲜见 ．本文在严格避光及低温的条件下，用紫 外扫描的方法发现在等离子点 pH(5．4)，Ag(I)与HSA或 BSA的结合均存在其它体系不多见的滞后效 应 ；采用平衡透析法首次研究了等离子点pH(5．4)Ag(工)与HSA或 BSA的结合平衡；应用荧光光谱计算 了Sterm．Volmer常数，并用共振散射的方法研究了Ag(I)与HSA或BSA的相互作用． 1 实验部分 1．1 主要试剂及仪器 HSA和BSA均为电泳纯，购 自华美生物工程公司，AgNO3，NaAc，HAc，NaNO3，均为分析纯，购 自上海试 四赫维化工有限公司．所有溶液均用二次去离子水配制 ，电导率小于 1．1ISA和 BSA溶液用前新鲜配制，其浓 度按278nin处 1mg／LHSA和 BSA在 1cm光程时吸光度分别为0．531和0．667计算．用 ．10moL／LNaAc． HAc缓冲剂以保持 pH=5．4(4-0．02)，所有溶液的pH均用稀NaAc或HAc在 pHs．10A型数字酸度计上调控． 1．2 实验方法 1．2．1 滞后效应的测定、配制不同浓度 比的Ag(I)．HSA溶液和 Ag(I)．BSA溶液，用 VarianCARY100 收稿 日期：~ -12-17 基金项 目：国家 自然科学基金 (2o26aoou资助项 目． 作者简介：宋 铮 (1975．)，女，江苏江阴人 ，副教