ASB-8在粒系细胞分化中的功能的研究.pdfVIP

刚眸与前瞻 生命科学领域青年科学暮年会·2007 ■羹五届北京生命科学领域联合年会 3．中国专利法实施细则，2001年6月15日中华人民共和国 ASB．8在粒系细胞分化中的功能研究 国务院令第306号公布 4．吕炳斌．卢捷清．论加入WTO与中国生物制药产业的专 ——嚷金云刘晓玲张俊武—— 中国医学科学院 利保护问题，今日科技，200215 ，42·45： 中国协和医科大学基础医学研究所 5，江镇华，怎样检索中外专利文献北京，知识产权出版社， 医学分子生物学国家重点实验室 2001定 作者简介：李绩男工程师，毕业于天津科技大学 作者简介：袁金云．河南师大硕士研究生毕业，现为中国协和 发酵工程专业硕士 医大博士研究生：刘晓玲．山西医大硕士研究生毕业．现为中国 工作单位：中国食品发酵工业研究院． 医科院助研．在职博士研究生：张俊武，中国协和医大硕士研究生 of 毕业．4年多在UnM feIlow。研究员．博 从事生物技术研发工作和知识产权事务。 Washington做senior 中国知识产权研究会高级会员 士生导师。发表SCI研究论文36篇。获多项国家和部级成果奖。 中国食品发酵工业研究院 1998年评为国家突出贡献中青年专家。 北京市朝阳区宵云路32号邮编：100027 粒系细胞形成是一个复杂过程．包括骨髓多能干细胞向多能 髓系祖细胞进而向粒系的分化决定以及粒系祖细胞进一步分化发 育成具有功能活性的粒细胞。这个过程涉及细胞内粒系特异的和 广泛表达的控制分化的转录因子基因和其他蛋白基因的活化或抑 肿瘤侵袭转移性相关microRNA的研究 制。另外，一些转录因子的表达也受到细胞因子信号的调控。近 ——何湘君张旗潘秀英—— 来发现至少有3个不同家族的抑制因子参与细胞因子信号通路的 中国食品发酵工业研究院 负调控：细胞因子信号蛋白抑制因子 SOCS 蛋白，蛋白酪氨酸磷 酸化酶如SHP-1，SHP-2和CD45．孔峨蛋白抑制因子 PIAs 。 miRNA是一类新发现的．由大约22个核苷酸组成的单链非编 码RNA，对基因表达具有转录后调节作用．参与调控各种生理和 我们用DDRT-PCR方法分析了人多能造血干细胞 HSC ．多 病理活动．包括细胞分化．凋亡．增生以及肿瘤形成。据报导，50％ 能髓样祖细胞 CMPl．红系祖细胞 EI， ．巨核系祖细胞 MP 和粒 的miRNA基因位于肿瘤相关的基因组区域或染色体容易断裂的脆 系祖细胞 GP 的基因表达差异，获得干细胞向这些链系分化相关 性地带，已发现在多种肿瘤中有特定miRNA的表达改变，在肿瘤 基因的线索．并从中选择了一些进行功能研究。其中一个是ASB8 andSOCS 【ankyflnrepeat 8】。ASB一8蛋白的 进展的不同阶段，其mlRNA的表达谱也有差异，而且mlRNA的差 box-contalning 异较mRNA的差异更明显。肿瘤转移是患者死亡的主要原因．理 52·182氨基酸为4个ankyrinrepeat，235．288氨基酸为SOCS box．属于SOCS蛋白家族成员。DDRT-PCR分析显示ASB一8基 解肿瘤转移的分子机制是肿瘤研究的重点之一。通过比较转移与 非转移性肿瘤细胞的基因表达差异，人们已发现了一些转移相关 因在HsC，CMP．EP和MP中表达很低．而在GP中显著上调。用 Realt|me 的基因，miRNA是否调控这些基因的表达以及哪些miRNA与肿瘤 pCR方法进行，获得与DDRT-PCR分析一致的结果，说 明AsB一8可能在人粒系分化中发挥作用。用RealmmePCR分析 的侵袭转移性相关尚未见报导。SKOV3．ipl细胞是从荷人Sl CⅣ3 腹腔瘤的裸鼠腹水中克隆出来的卵巢癌细胞亚系，比SKov3恶性 人血液细胞系中ASB一8mRNA的表达，发现其在NB4中高表达． 程度更高．侵袭转移能力更强，这两种细胞是研究肿瘤侵袭转移的 在Raii．Hut-78和Jurkat中几乎不表达。用RealmmePCR分析． 很好模型。我们用自己建立的一种相对廉价的RNA加尾和引物 发现在ATRA诱导人髓白血病细胞系Hb60和NB4向粒系分化过 延伸实时定量RT-PCR法．对SKOV3和SKOV3．叫这两种同一来源 但侵袭转移性不同的肿瘤细胞系的mlRNA进行初步的差异表达 程中，AsB一8mRNA的表达均呈现持续上调趋势．72h达到4倍 多。我们构建了ASB—pEGFP的融合质粒，转染NIH一3T3细胞．发 研究，发现了一些在SKOV3．ipl细胞中表达上调和下调的miRNA， 如miR一1 现ASB-8蛋白定位在细胞质，并在集中在细胞核周围。为了进一 7-5p，mlR．30—3p．mlR一30—5p．mlR-21．miR．