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第五节 基因工程 一 、 基因工程概述 二 、 限制性内切核酸酶 三 、 载体 四 、 基因的分离与鉴定 五 、 基因工程的应用 一 、 基因工程概述 （一）概述 （二）基本步骤 （一） 概述 遗传工程一般有广义和狭义之分。广义的遗传工程包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程等。狭义的遗传工程即是通常讲的基因工程。本节只介绍基因工程。 基因工程：指在体外将不同来源的DNA进行剪切和重组，形成嵌镶DNA分子，然后将之导入宿主细胞，使其扩增表达，从而使宿主细胞获得新的遗传特性，产生新的基因产物。 （一） 概述 基因工程是20世纪70年代初随着DNA重组技术的发展应运而生的一门新技术。1971年美国的 Smith,H.O.等人利用从细菌中分离的一种限制性酶酶切病毒DNA分子，标志着基因工程或DNA重组时代的到来。接着，伯格(Berg,P.)等人于1972年用一种限制性酶分别酶切猿猴病毒DNA与λ噬菌体DNA,再将这两种DNA片段放在一起，用DNA连接酶连接起来，结果得到了一种新的DNA分子。 （一） 概述 1973年科恩(Cohen,S.)等人进一步将酶切后的外源DNA片段与质粒DNA连接起来,构成一个重组质粒(recombinant plasmid),并将这个重组质粒转入大肠杆菌细胞。这些开创性的工作为基因工程建立了一套完整的方法和体系,成为现代生物学发展史上的重