新型肝癌免疫毒素A54-PE40KDEL的构建表达与活性鉴定 Construction,expression and functional characterization of a novel anti-hepatocarcinoma immunotoxin A54-PE40KDEL.pdfVIP

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新型肝癌免疫毒素A54-PE40KDEL的构建表达与活性鉴定 Construction,expression and functional characterization of a novel anti-hepatocarcinoma immunotoxin A54-PE40KDEL.pdf

·346· 新型肝癌免疫毒素A54.PE40KDEL的构建表达与活性鉴定① 虞丽平韩红辉石凌超杜冰张小平周忠良钱曼 (牮东瘘范大学生命稃学学浣,上海200062) 文献标识码A 中国图书分类号R392.11 文章编号looo-4s4x(2009)懈os [摘要] 绿脓杆菌外毒素A blot证实表达产物含Mr约58 细胞毒性及靶向性。结果:蕈组质粒序列正确,经Western 疗提供了一条霹褥鹃途径。 【关键词]免疫毒素;肝癌;绿脓杆菌外毒素A;特异性结合肽 andfunctionalcharacterizationofanovel Construction,expression nomaimmunotoxinA54一PE40KDEL YU Min。School Hong-Hui,SillLing-Chao,DU挠昭,ZHANGXiao-Ping,ZHOU of l_At气ng,HAN Zhong-Uang,QL4N mormal China 200062,China 啦Science,East University,Shanghai constructthe ofanovel immunotoxinA54-IV_AOKDEL, [Abstract]Objective:Toprokaryotieexpressingsystem anti-hepatocarcinoma andtocharacterizeitsfUllLctiOllS。Methods:Theof exotoxinAPE40KDELwas PCRandthenimerted genepseudomonas amplifiedby into#as— mid for A54and site pET32a(+).Thesynthesizedsequenceencodinghepatoca托inerm-specifiebindingpeptide the捌xpe】僦forrecognition ofenterokinasew酗in-frmnewithrecombinant recombinant protease ligated pKF32a(+)一PFAOKI)EL.r11’eplasmidpET32a(+)一越m PFAOKDEI.WasconfirmedandthentransformedintoE.col/B121for wa6 fiomsoluble ofthe expression.The pu商ed fbi加protein proteins transformed ImmobilizedMetal—Chelated enterokinasetoreleasetherecombinant k-cteri&by affinitychnrmtngmphyand蛳tedby protease and oftherecombinantimmunowxintodifferentcelllineswereevaluated immunotoxin,954-PE40KDEL。’specificbindingability

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