日本脑炎DNA疫苗研究进展.pdfVIP

出丕匡药2鲤2生箜塑鲞筮主呈塑 日本脑炎DNA疫苗研究进展 张静。王青‘ (解放军第210医院403临床部，辽宁大连116021) 关键词：脑炎病毒；日本；DNA疫苗 中图分类号：R373．3l文献标志码：A 文章编号：l002．266X(2009)52m112旬2 由于传统的灭活和减毒活疫苗在预防日本脑炎病毒 蛋白诱导免疫反应的能力很强。E蛋白的正确折叠、在低 (JEV)感染中的广泛应用，部分JEV感染的发生和流行得到pH值下保持稳定以及分泌都依赖prM蛋白的共表达。M蛋 了有效控制。但是病毒灭活疫苗制备起来费用较高、不能诱 白是黄病毒体在其发育成熟过程中，由其前体蛋白prM经宿 导长期的免疫力、更重要的是容易带来超敏反应的风险，同 主蛋白酶裂解Jfii成的。由于prM蛋白常常裂解不完全，部分 时病毒减毒活疫苗相对不稳定、毒力有可能回升…。DNA 成熟的黄病毒体仍含有此蛋白，故针对prM蛋白的单克隆抗 疫苗的出现为JEV感染的疫苗预防开拓了新的领域。但是 体也可中和那些含prM蛋白的黄病毒体。单纯以prM蛋白 DNA免疫后所产生的中和抗体效价与cTIJ8功能仍达不到基因构建DNA疫苗进行实验研究尚不多见，但以prM-E蛋 灭活或减毒活疫苗所致的实际标准。为此，人们在如何提高 白编码基因作为候选基因用于DNA疫苗的研究深受关注。 黄病毒DNA疫苗的免疫原性、诱导强烈免疫应答等方面进 Konjshi等怕1利用含有JEVprM—E基因的质粒免疫小鼠，结 行了深入的研究。 果表明该质粒能够诱导包含JEV特异性的抗体和clk的 1 日本脑炎DNA疫苗相关基因免疫原性 保护性免疫反应。两次免疫能够诱导滴度在l：lO～l：20的 000 黄病毒基因组为一条长约1lkb的单正链RNA。基因中和抗体，所有免疫小鼠受到10 LD50的JEVP3株攻击 组只含有一条长的开放读码框(ORF)，编码一个大的多蛋后存活；1次免疫不能诱导可检测到的中和抗体，但诱导了 白，在翻译过程中和翻译后被剪切成lO个蛋白，近5’端l／4 区段编码3个结构蛋白C、prM(precu璐orM)和E蛋白，近3’ 组质粒，通过肌肉注射免疫ICR小鼠。结果巾和抗体滴度达 端3／4区段编码7个非结构蛋白NSl、NS2A、NS2B、NS3、 Ns4A、NS4B、NS5。与黄病毒DNA疫苗研究有关的黄病毒 毒领域中，prM与E蛋白编码基因所进行的DNA疫苗研究 基因组各区段的选取主要集中于prM、E以及NSl蛋白基 因等。 具有一定的代表性。 1．1 prM、E蛋白基因E蛋白是黄病毒病毒体表面的主要 1．2 NSl蛋白基因可表达于感染细胞表面并可分泌到细 蛋白，介导受体结合和膜融合，在黄病毒的致病性与免疫性 胞外的Nsl蛋白不但可使机体产生免疫反应，而且在实验 方面起十分重要作用，可使机体产生广泛的体液与细胞免疫 动物模型中，其诱导的中和抗体可产生有效的保护性免疫而 使免疫动物免于致死性病毒的攻击。在早期用痘苗病毒、辛 反应，并可诱导有效的保护性免疫。wu等旧1将BeijiIlg- 德比斯病毒、杆状病毒的重组病毒作为表达载体的研究中， lJEV株E基因cDNA克隆到pcDNA-3．1载体构建DNA疫 JEV的Nsl蛋白只能诱导低水平的保护性免疫。然而，“n 苗，用基因枪免疫C3H／HeN小鼠，实验结果表明用编码Bei- jiIIg一1JEV株E蛋白的DNA疫苗可以有效地诱导针对两个 台湾JEV株CH2195和CEN的交叉保护，保护力达到90％。