双酯型乌头碱完全抗原的制备与鉴定.pdfVIP

河南农业科学，2014，43(12)：156—159 JournalofHenan Sciences Agricultural 双酯型乌头碱完全抗原的制备与鉴定 陆 辉1，李 晶2，左伟勇1，王 健1，王永娟¨ (1．江苏农牧科技职业学院江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室，江苏泰州225300； 2．长春市环境监测中心站，吉林长春130011) 摘要：为制备双酯型鸟头碱(DAC)的完全抗原，通过活化酯法将小分子的DAC偶联到牛血清白蛋 谱法、BCA试剂盒法、酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定偶联结果。结果表明，免疫原和检测原均偶联 成功；按100肛g／只的剂量每2周免疫一次小鼠，共免疫5次，最后一次免疫4d后，眼眶静脉采血， 测定多抗血清的效价均达到1：25600，且第2组小鼠多抗血清的敏感性最好，半数抑制浓度 (IC。。)为30 ng／mL，最低检出限为1ng／mL，与其他药物的交叉反应率均小于1％，具有很好的特 异性。成功合成了DAC人工抗原，并得到了敏感性高、特异性好的多抗血清。 关键词：鸟头碱；双酯型鸟头碱；活化酯法；完全抗原；制备；鉴定 中图分类号：S859．83文献标志码：A andIdentificationofthe of Preparation CompleteAntigen DoubleEsterAconitine LUHuil，LI uanl’ Wei—yon91，WANGJianl，WANG Jin92，ZUo Yong-j Province of (1．Jiangsu KeyLaboratoryHigh—techResearch，JiangsuAgri—animalHusbandry Vocational College，Taizhou225300，China； EnvironmentalCenter 130011，China) 2．ChangchunMunicipal MonitoringStation，Changchun of bovineserumalbumin Abst仡ct：To DAC，ovalbumin(oVA)and preparecompleteantigens (BSA)wereusedas carriersto DAC activeester protein synthesizeantigensby DAC-BSAwasusedas whileDAC一0VAasdetection UV immunogen antigen． scanning kitmethodand immunosorbent usedto spectroscopy，BCA enzyme-linked assay(ELISA)were 1 determinethe results．Micewereimmunizedwith once twoweeks