同时放化疗敏感性不同中晚期宫颈癌蛋白质组学比较的初步研究.pdfVIP

·298· ·论著· 同时放化疗敏感性不同中晚期宫颈癌 蛋白质组学比较的初步研究 朱红 曾亮廖遇平 肖志强 【摘要】 目的 比较同时放化疗高敏感和低敏感中晚期宫颈癌组织之间蛋白质组的差异，识别 和鉴定高敏感组和低敏感组之间差异表达蛋白，为中晚期宫颈癌患者同时放化疗敏感性的预测提供 依据。方法搜集治疗前的中晚期宫颈癌组织标本10例，病理诊断均为中分化鳞状细胞癌。在进行 同时放化疗后，根据WHO实体瘤疗效判断标准将宫颈癌组织标本分为高敏感组(5例)和低敏感组 (5例)。提取组织总蛋白，进行二维凝胶电泳得到凝胶图谱；采用PD—quest7．0软件进行匹配和差异 分析，识别两组之间表达差异蛋白点。将这些差异蛋白点进行胶内原位切割、酶解后进行MALDI— TOF—MS分析，获取肽质量指纹图，数据库搜索鉴定蛋白质。应用Westernblot方法检测其中2个差异 表达蛋白Galectin-7和热休克蛋白70在10例宫颈癌组织标本中的表达。应用免疫组织化学方法检 测Galectin-7和热休克蛋白70在95例临床活检中的表达情况。结果建立了分辨率高、重复性好的 宫颈癌同时放化疗敏感组和不敏感组的双向凝胶电泳图谱。高敏感组蛋白点数为(78l±74)个，低 敏感组蛋白点数为(766±52)个，组间平均匹配率为87．6％。选择部分差异在2倍以上的蛋白斑点进 行质谱分析、19个差异表达蛋白被成功鉴定，其中8个蛋白质在高敏感组高表达，10个蛋白质在高敏 感组低表达。免疫印迹和免疫组织化学结果显示：热休克蛋白70在低敏感组中的表达率显著高于高 敏感组，而Galectin-7在高敏感组中的表达率显著高于低敏感组，这一结果也与蛋白质组筛选结果基 本一致。结论同时放化疗高敏感组和低敏感组宫颈癌组织间存在蛋白表达的差异，这些差异表达 的蛋白可能与放化疗敏感性有关。 【关键词】宫颈肿瘤／放化疗法，蛋白质组学；质谱分析 carcinomatissueswithdifferent to ofcervical Preliminarycomparativeproteomicsstudy sensitivity concurrent chemoradiotherapyZHU舶增’，ZENGLiang，L1AOYu-ping，X1AOZhi—qiang． of 410008，China DepartmentOneology，XiangyaHospital，Central—SouthUniversity，Changsha betweenthe To the differences 【Abstract】Objectiveinvestigate high—sensitivity(HS) proteomics andthe ofcervical treatedconcurrent to carcinoma low—sensitivity(LS)groups by chemoradiotherapy，and confirmthe associatedinintermediateandadvancedcervicalcarcinoma．Methods sensitivity proteins stage Freshcarcinomatissueswerecollectedfrom10untreatedcervicalcarcinoma tothe patients．According toconcur