车前草中熊果酸的分离制备及其含量测定.pdfVIP

江西中医药2012年8月第8期总43卷第356期 促进经济发展具有重要意义。为了寻找适合于批 石油醚，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚等 量生产熊果酸的植物原料 ，对车前草进行了提取分 有机溶剂。O『L]D20+65。(cO．095，EtOH)，mp285—287~C， 离实验，并测定了样品中熊果酸的含量。 与熊果酸对照品混合熔点不下降。 1 材料与方法 2．2 定性鉴别 Liebermann—Burchard反应 ：取熊果 1．1材料试剂 车前草 ，购于江西省宜春市第一人 酸样品约2mg，以lmL95％乙醇溶解，吸取熊果酸乙 民医院，经省天然药物活性成分研究重点实验室鉴 醇溶液1滴，置试管中，加醋酐试剂lmL，摇匀，沿试 定为车前科植物车前(PlantagoasiaticaL)；甲醇 (色 管壁缓缓加人浓硫酸试剂 lmL，在醋酐与浓硫酸界 谱纯)上海陆忠试剂厂，95％乙醇(食用级)，广西糖 面上呈现紫红色圆环。 厂产 ；活性炭(分析纯)，上海豪 申化学试剂有限公 2．3 薄层层析鉴定 取硅胶G，加0．5％的CMC—Na 司产 ；熊果酸对照品，由中国药品生物制品检定所 制成硬板 ，晾干后于110oC活化 1小时备用，取熊果 提供。 酸样品约2mg，加 lmL95％乙醇溶解，点样，同时用 1．2 仪器设备 Waters一515型双泵高效液相色谱 熊果酸对照品作对照，以环己烷 丙酮 (3：1)为展开 仪，2996光电二极管矩阵检测器 (美国)；Perkin—E1． 剂 ，展距 10cm，晾干 ，喷以10％硫酸 乙醇溶液 ，于 mer傅立叶变换红外光谱仪 (美国)；显微熔点测定 110℃加热 10分钟 ，结果在与对照品相应的位置上 仪 (北京)；WZZ—IS数字式自动旋光仪(上海)。 显相同颜色的紫红色斑点，在365nm紫外光下显相 1_3制备方法 采用 “醇提凝析法”制备 1，将干燥的 同颜色的金黄色荧光斑点。 车前草全草粉碎成粗粉 (20目)，用乙醇回流提取2 2．4 红外光谱鉴定 样品IR妯 cm～：3434(一OH)、 基金项目：国家 “863”高技术研究发展计划项目(项目编号：2002AA2Z3217)。 }作者简介：兰平生(1956一)，男，江西丰城人，主管药师，主要研究方向：药物制剂制备与分析，Tel：0795—6422334，E—mail：plato1031@qq．com。 }}通讯作者：李开泉(1954一)，男，教授，硕士生导师，主要研究方向：天然药物化学，Te1：0795—3201986，E—mail：lkq54l024@163．corn。 · 65 · JIANGXIJOURNALOFTRADITIONALCHINESEMEDICINE 2968、2927、2871(C～H)、1694(C=O)、1456、1384 (CH，)、103l(C一0)。根据 以上数据确定样品为熊 果酸 1。 2．5 含量测定 2．5．1 色谱条件 SymmetryShieldRP一18色谱柱 (3．9x150mmcolumn，美国Waters公司)，柱温25℃， 流动相为甲醇一水(88：12)，流速 lmL／分。 2．5．2检测波长的确定 熊果酸在流动相中的紫外 吸收光谱显示其最大吸收波长为202．2nm，但溶剂 甲醇在短波长处亦有吸收 ，为减少干扰 ，且不至于 降低灵敏度，故确定220nm为检测波长。 2．5．3 对照品溶液的配制 精密称取熊果酸对照品 5．75mg，置于5mL容量瓶中，用 甲醇溶解并稀释至 刻度 ，摇匀，制成含熊果酸 1．15mg／mL的对照品溶 液。 2．5．4 线性关系试验 用微量注射器分别吸取熊果 b．车前草样品Plantagoasiaticasample 酸对照品溶液4、8、l2、16、20L，按4．2色