流感病毒多表位核酸疫苗CTBEg的构建与细胞转染研究.pdfVIP

· 182· Medwest 西部医学2015年2月第27卷第2期J China，February 流感病毒多表位核酸疫苗CTB—Eg的构建 与细胞转染研究* 寇静远1 潘兴1 李婉宜1 邝玉1 周琳琳1 杨靖2 石新丽1 陆顺顺1 黄筱钧1 邓昭敏1 秦臻1 王保宁1 李明远1 (1．四川大学华西基础医学与法医学院微生物教研室，四川成都610041； 2．湖北医药学院微生物学教研室，湖北十堰442000) 【摘要】 目的 的转染效率。方法通过生物信息学软件设计并合成了含分子内佐剂的流感病毒多表位基因CT吕Eg，将其插入真核 PCR法检测其转染效率。结果 瞬时转染，转染效率在50％～70％之间。结论本研究成功设计、构建了C丁吕Eg融合基因，其在HEK293T细胞中转 染效率较高，为流感病毒多表位核酸疫苗CTBEg在小鼠体内的抗病毒作用研究奠定了坚实基础。 【关键词】流感病毒；核酸疫苗；多表住基因；霍乱毒素B亚单位 181．2+4 【中图分类号】R 【文献标志码】A doi：10．3969／j．issn．1672—3511．2015．02．007 COnstructiOnandtransfectiOn0fa DNAVaccine of multi·epitope CTB—Eg K0u Jin争yuanl，PANxingl，Llwan_yil，以口Z Sc矗DDZ 1004 (1．DP舻，fmP行fo，M打r06ioZogy，WP盯C^fno，P卯“抽imZ口ndFb卯”s站M耐洒nP，Si如抛竹Uhi御”缸y，C矗删gd“61，Chi订n； 2．De户nr￡，”e”fo，M缸r06ioZogy，H“6FiU”it增rsif了o，MPd拓i”P，S^iy口卯442000，C^in口) To and 【Abstnca constructthe vectorof fusiono“nfluenza objectivedesign eukaryoticexpressionCTBEggene the virus，and transfectionof inHEK293Tcells．Methods fusion study efficiencypEGFP—C2／CTB—Eg CTB—Eg gene CTB(choleratoxinBsubunit)asthemolecule was and containing adjuvant designedsynthesized．Theeukaryoticexpres— sionvectorof wasconstructed．Thecertifiedrecombinantwastransfectedin pEGFP-C2／CTBEg plasmid HEK293Tcens Transfection transfectionof byLiposomal wasdetectedfluorescence