不同酶源乙酰胆碱酯酶的抑制剂筛选.pdfVIP

第 1 卷第3 期 神经药理学报 Vol. 1 No. 3 2011 年6 月 Acta Neuropharmacologica June. 2011 不同酶源乙酰胆碱酯酶的抑制剂筛选 方法比较 1，2 1 1 刘佳莉   苑玉和   陈乃宏 1. 天然药物活性物质与功能国家重点实验室，中国医学科学院北京协和医学院药物研究所，北 京，100050 ，中国 2. 天津中医药大学，天津，300 193 ，中国 【摘要】 目的：建立一种可靠、快速、便捷、经济的乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase ，AChE）抑制剂的筛选方 法，为新药发现阶段AChE 抑制剂的筛选提供经济可靠的微量筛选方法，然后对植物提取物样品进行筛选。方 法：分别采用电鳗AChE 、人源红细胞AChE 、大鼠海马区、纹状体匀浆液中的AChE 为酶源。以96 孔板为载体， 利用优化的Ellman 方法，在生理pH 值和温度的条件下，以他克林和石杉碱甲作为阳性对照，检测对不同酶源 AChE 的抑制作用，确定最佳酶反应条件（最佳底物浓度、反应时间、显色剂浓度），并对植物提取物样品的AChE 抑制作用进行检测。结果：采用上述四种酶源的AChE 进行AChE 抑制剂微量筛选方法操作简便快速、可靠经济。 其中应用电鳗AChE 进行筛选显示灵敏度较高，他克林和石杉碱甲对电鳗AChE 的抑制作用相当，而对人源红 细胞AChE 、大鼠海马区、纹状体匀浆酶源的抑制作用，石杉碱甲明显优于他克林，所筛选植物提取物对AChE 均没有抑制作用。结论：本实验中所建立的筛选方法操作简便、快速、可靠经济，可用于纯化合物的筛选。 【关键词】乙酰胆碱酯酶；石杉碱甲；他克林；阿尔茨海默病 - -0027-004 【中图分类号】R965.1 【文献标识码】A 文章编号：2095 1396 （20 11）03 Comparative Study on Screening Acetylcholinesterase Inhibitors from Different Enzyme Sources 1，2 1 1 - - - LIU Jia li ，YUAN Yu he ，CHEN Nai hong 1. State Key Laboratory of Bioactive Substance and Function of Natural Medicines ，Institute of Materia Medica ， Chinese Academy of Medical Science and Peking Union Medical College ，Beij ing ，100050 ，China 2. Tianj in University of Traditional Chinese Medicine ，Tianj in ，300 193 ，China 【ABSTRACT 】Obj ective ：To establish a reliab