制备大鼠离体心脏损伤模型的最佳缺血再灌注时间.pdfVIP

J 2012 ·353· 中国药理学与毒理学杂志2012年6月第26卷第3期ChinP，Ⅻm∞“Toxtcol，Yol26，№3．Jan 制备大鼠离体心脏损伤模型的最佳缺血再灌注时间 郭丽丽1。王阶1，陈雯1，周婷婷2 (1．中国中医科学院广安门医院心血管病症结合实验室，北京100053；2．沈阳药科大学生命科学 与生物制药学院，辽宁沈阳l10016) 摘要：目的探索离体心脏最佳缺血再灌注(I／R)时间，增加制备可用于心肌保护药物的方法筛选的 离体心脏I／R模型的成功率。方法采用Langendorff离体心脏恒压灌流模式，缺血31min后，分别于再灌 5，10。20和30 期间，LVEDP升高，心肌挛缩。再灌时90％心脏可成功自主复跳，100％复跳心脏出现心律失常(室速或室 min，再灌30min可成 颤)，持续约5—10rain。再灌后LVDP下降、左心室最大舒缩速度下降。结论停灌31 功制备出用于药物筛选的离体心脏I／R损伤模型。 关键词：缺血；再灌注损伤；模型：离体心脏 中图分类号：R965．1文献标志码：A 文章编号：1000-3002(2012)03-0353埘 DOI：10．3867／j．issn．1000-3002．2012．03．018 再灌注是急性冠脉综合征尤其是急性心肌梗死 最佳治疗方法。但再灌注常导致心律失常、心肌舒 常州千红生化制药股份有限公司，批号：081208)； 缩功能障碍及心肌细胞不可逆损伤加重等并发症发 戊巴比妥钠(国药集团化学试剂有限公司，批号： WS2005l 生，出现再灌注损伤(ischemierepeffusioninjury， 129)。其余试剂均为国产分析纯。 ira)，IRI是再灌注治疗面临的颇为棘手的问题之1．2动物与模型制备 一…。离体心脏IRI模型是心肌IRI机制研究和心 Wistar大鼠，6，体质量250—270g，购自中国 血管药物筛选常用工具旧。4J。标准规范的模型对机 医学科学院实验动物研究所繁育场，SPF级，许可证 制研究及药物作用的评价极其霞要。但规范的模型 建立需要一定的知识和技巧，文献未见有系统报道。 院动物室适应性饲养3d。 本研究探索离体心脏最佳缺血再灌注(IVR)时间， 按文献[5]操作，大鼠ip给予肝素1000U·kg。 增加制备可用于心肌保护药物的方法筛选的离体心 抗凝，30rain后ip注射戊巴比妥钠50mg·kg“麻 脏∥R模型的成功率。 醉。取出心脏置于0—4℃的生理盐水中，轻轻挤出 淤血，经主动脉将其固定于体外灌流装置，灌流高度 1材料与方法 80cmH：O柱，逆行恒压灌注。灌流液组成 (retool·L一：NaCl118，NaHC0323．8，KCI4．7， 1．1仪器和试剂 MgS041．2，KH2P041．2，CaCl22．5，葡萄糖11．O)。 大鼠用离体工作心脏灌流装置为Radnoti产 向上述灌流液中通人95％02和5％CO：混合气体 品，蠕动泵为ColePanner公司产品，心室压力检测 7．4(37℃)。灌注液及心脏周围温度用恒温 调pH 球囊为Kent公司产品，压力传感器、生物功能检测循环水浴维持在(37t-0．5)℃。将球囊插入左心 仪为AD公司PowerLab系列产品，数据处理软件 室，连接压力传感器