旋转生物反应器培养对组织工程气管软骨力学强度的影响.pdfVIP

Chin 中国医药生物技术2008年4月第3卷第2期MedBiotechnol。April2008，Vol。3，No．2 ·论著· 旋转生物反应器培养对组织工程气管软骨 力学强度的影响 Weder 杨林，武延格，纪玲，王正，Walter 【摘要】 在DegraP01支架的表面，而支架的中央部分缺少 目的研究旋转生物反应器培养对组织工程气管软骨力学 细胞和基质成分。这可能与体外静态培养环境有 强度的影响，探索适宜的组织工程气管软骨培养方法。 关。有研究表明生物反应器培养技术可以解决静态 培养条件下培养液分布不均匀所致软骨层薄厚不 方法分离2周龄Lewis大鼠剑突软骨细胞传代培养，收 均一等缺陷【5】。为此，我们就旋转生物反应器培养 集第3代软骨细胞种植到DegraPol管状支架上，静态培 养7d，然后将软骨细胞．支架复合物分别置于旋转生物反 技术在组织工程气管软骨体外培养中的应用进行 应器内培养(生物反应器组)或继续静态培养培养3周(静 了研究，重点观察比较了不同培养环境对组织工程 态培养组)。取出软骨细胞．支架复合物，以噻唑蓝(Mrr)气管软骨力学强度的影响，为组织工程气管软骨培 法测定软骨细胞增殖活性，结果以吸光度(A)值表示(每养探索适宜的方法。 组n=6)；以Zwickl445型材料试验机测定软骨细胞．支架 复合物的最大应变值和应力值(每组咒=4)；并制备扫描电 1材料与方法 1．1主要材料和仪器 镜标本，观察软骨细胞在DegraP01支架中培养后的超微结 构变化。 DegraPol(3一Dpolyester-urethanepolymer)材 料由瑞士联邦理工大学聚合材料研究所提供。采用 结果不同条件下培养3周，生物反应器组和静态培养组 冷沉淀技术【6】将DegraPol材料制成泡沫管状支 A值分别O．17±0．05、0．12±0．01，最大应力值分别为 架。支架长20rain，内、外径分别为2．5、4．0IIlIIl， (0．33±0．04)和(0．26±0．01)MPa，最大应变值分别为 管壁厚度为0。75mm，环氧乙烷消毒后，置于已灭 (3。53士0．91)和(1。71±0。13)ml形nlln，2组问3项指标 菌的培养瓶中备用。Ham’SF12培养液、胎牛血清、 的差异均有统计学意义(均P0．05)。扫描电镜观察显示 Ⅱ型胶原酶、乙二胺四乙酸(EDTA)、噻唑蓝 生物反应器组获得更好的软骨样结构和更多的细胞外基质。 (MTT)、Costar 3376型75cm2细胞培养瓶、12孔 结论旋转生物反应器能够提供更好的体外培养条件，有利 于组织工程气管软骨的形成。 型荧光倒置显微镜为日本Olympus公司产品； 【关键词】组织工程； 软骨细胞： 生物反应器 www．cmbp．net．cn 中国医药生物技术．2008,3(2)：88-92 品；JSM一25