柱前衍生HPLC荧光法测定人血清中的饱和与不饱和脂肪酸.pdfVIP

·4714· 现代预防医学2007年第34卷第24期ModemPreventive 文章编号：1003—8507(2007124—4714—04 文献标识码：A 中图分类号：Q547 【实验技术及其应用】 柱前衍生一HPLC荧光法测定人血清中的 饱和与不饱和脂肪酸 李谦1，张晓萍2，邱宗荫2 近20年来，许多荧光衍生化试剂已被用于脂肪酸的高效 想的衍生化试剂，生成的酯衍生物荧光强度稳定，不随溶剂 液相色谱(HPLC)测定。这些试剂灵敏度较高．但还不能测 定超痕量水平的脂肪酸[t-“。本文用3一溴甲基一6．7一二甲氧 定量。血清用量少，仅10“l，方法简便，需时短，用人体 基一1一甲基一1一(1H)喹喔啉酮[3-bromomethyl一6，7-dimethoxv一 C17：O)作内标，方法熏 1-methyl-2(1H)一quinoxalinone(Br-DMEQ)]作衍生化试剂[3]，中并不存在的十七烷酸(Margaric 在反相一HPLC上分离、测定了人血清中游离脂肪酸，包括检现性好，结果满意，检测限达到O．2pg／ml，操作简便，为 测含量低微、具有重要生理活性的花生四烯酸(arachidonic 常规测定血清中游离脂肪酸提供了一种灵敏、快速的HPLC 方法。 C20：4)、二十碳五烯酸(eicosapentaenoicC20：5)、二十二 碳六烯酸(docosahevaenoicC22：6)、亚麻酸(1inolenicC18： 3)、亚油酸(1inoleie 1仪器与试剂 C18：2)等。Br—DMEQ可与脂肪酸在乙 腈或丙酮中反应。反应产物单一，反应条件较温和。是一个理 1．1仪器 作者简介：李谦(1963一)，女，硕士，主管技师，研究方向：理化检 验 mmx6．0 CLC—C8(150mmqb)。 色谱柱为岛津shim—pack 作者单位：1．I舀Jtl省自贡市疾病预防控制中心，自贡，643000；2．重 1．2试剂 庆医科大学 (1)Br-DMEQ溶液；称取0．3 mj 现代预防医学2007年第34卷第24期ModemPreventive ·4715· Medicine，2007，V01．34，NO．24 乙腈溶液中，此溶液冰箱保存可稳定2周(购自sigma公司)。 ml乙 (2)18一冠醚一6溶液：称取10．Omg18一冠醚一6溶于10．0 腈溶液中，此溶液置冰箱保存(购自sigma公司)。(3)碳酸钾： 分析纯(上海试剂厂)。(4)氯仿：分析纯(重庆东方试剂厂)。 (5)正庚烷：分析纯(苏州市第二化工研究所)。(6)乙腈：色谱 毪 纯(上海脑研究所)。(7)水：超纯水(自制)。(8)流动相：74％ 蜃 乙腈一水溶液，用前超声波脱气处理。 (9)脂肪酸标准溶