石榴皮抗氧化物质提取及其体外抗氧化作用研究.pdfVIP

维普资讯 第 26卷第 2期 营 养 学 报 Vol_26．NO．2 2004年 4 月 ACTANUTRIMENTASINICA Apr．，2004 石榴皮抗氧化物质提取及其体外 抗氧化作用研究 李云峰，郭长江，杨继军，韦京豫，徐 静，程 霜 (卫生学环境医学研究所，天津，300050) I摘 要l 目的：研究石榴皮提取物体外清除 自由基的作用及对低密度脂蛋白 (LDL)氧化的影响。方 法： 采用 0i、·OH、ROO ·等 自由基的生成体系，研究石榴皮提取物清除 自由基的活性，并进一步采用 LDL体外氧化模型 ，研究对LDL氧化的抑制作用，并与石榴果汁提取物相 比较。结采 两种提取物均可 以有效清除 0；、 ·OH、ROO ·自由基，抑制LDL氧化，其活性具有剂量效应关系；果皮提取物的各种 活性均强于果汁提取物。结论 石榴皮所合天然抗氧化物质能有效清除 0；、 ·OH、ROO ·等 自由基， 抑制LDL氧化，因而可能具有抑制动脉粥样硬化 (AS)的作用。 关键词：石榴皮；抗氧化；自由基；低密度脂蛋白 中图分类号：R151．4 文献标识码：A 文章编号： 石榴是石榴科木本植物石榴的果实，是很多人喜 1．2 实验方法 爱的水果，近两年，欧、美、日等国家已初步展开石 1．2．i石榴皮抗氧化物质提取：将石榴皮剪碎，以不 榴在抗氧化方面的研究 叫。结果显示，石榴果汁或果 同溶剂提取，提取液过滤、真空干燥得棕色粉末，收 汁提取物能够有效地清除羟自由基和超氧阴离子 自由 率 (％)=提取物重 (g)／石榴皮原料重 (g)×100， 基，抑制LDL和脂质过氧化，抑制动脉粥样硬化 (AS) 石榴果汁提取方法同上。 斑块的形成。本实验室以往的研究还发现，石榴果皮 1．2．2 提取物抗氧化成分及含量： 主要测定多酚类 的抗氧化活力远远高于石榴果汁 ，本试验在提取石 (Folin-酚法，单宁酸为标准)、总黄酮 (分光光度法， 榴皮抗氧化物质的基础上，进一步考察石榴皮提取物 芦丁为标准)、原花色素(分光光度法，儿茶素为标准)、 体外对0i ·OH、R00·等自由基的清除能力及对 LDL 维生素C (荧光法) 及水分。 氧化的影响，并与石榴果汁提取物进行了比较，为今 1．2．3 总抗氧化力： FRAP法 ，取40 l样品，加 后深入研究奠定基础。 入 1．8ml37℃预温的FRAP工作液 (10mmol／LTPTZ、 20mmol／LFeC13、0．3mol／L醋酸钠缓冲液以1：1： 1 材 料 与 方 法 10的比例混合)，37℃水浴30min，于593 nm读取 1．1材料与试剂 吸光度值，结果以毫摩尔／克 FeS0提取物表示。 市售石榴 ，产地 陕西临潼 ；VC、槲皮 素 1．2．4 超氧阴离子 自由基 (0i)清除能力： 黄嘌 (quercetin)、儿茶素 (catechin)、芦丁、2，2’一偶氮 呤氧化酶法，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。 二 (2一 脒 基 丙 烷 )二 氯 [2，2’一azobis 1．2．5 脂过氧 自由基 (R00·)清除能力： 参考 ou (2-amidinopropane)dihydroch1oride，AAPH]、荧光 等 改进的ORAC方法，试管中加入 3．5×10mmol／L 素二钠、三毗啶三吖嗪 (tripyridyltriazine，TPTZ) 荧光素二钠 100 l，75n~nol／L磷酸缓冲液 3．5ml 购 自Sigma公司，其余为国产分析纯试剂。