大鼠肾移植动物模型实验研究.pdfVIP

中华临床医师杂志(电子版)2012年 1月第6卷第 1期 ChinJClinicians(ElectronicEdiSon)。January1．2012．Vo1．6．No．1 · 短 篇论 著 · 大鼠肾移植动物模型实验研究 李健 许亚宏 马小平 张 艮甫 黄赤兵 【摘要l 目的 探讨大鼠肾移植动物模型构建方案，提高该动物模型构建效能。方法 以封闭 群sD大鼠作为供、受体建立同系异体肾移植动物模型。原位灌注切取左侧供肾，保留肾动、静脉全 长；自供肾下极顺行钝性分离两侧输尿管，至膀胱开口部切取输尿管。于距肾门部约5mm处原位切 取受体左侧肾脏。端端吻合移植肾动脉；应用内支架法两定点(两点固定)端-端吻合移植肾静脉；采 用受体膀胱浆肌层隧道包埋法进行尿路重建。结果 构建大鼠肾移植动物模型54例次，成功49例， 手术成功率90．7％，静脉吻合时间为(6．2±1．5)min，尿路重建用时(7±2．O)min；术中肾静脉吻合 口 通畅率达 l0o％，术后病理检查未发现吻合 口血栓形成；术后尿路并发症发生率为 12．2％。结论 应 用内支架法行移植肾静脉吻合及包埋法行尿路重建操作性强、并发症少 ，可有效提高大鼠肾移植动物 模型构建效率。 【关键词】 肾移植；模型，动物；静脉吻合；尿路重建 大鼠肾移植动物模型是目前进行肾移植基础实验研究 液装 置，固定 留置针，打开灌 注液开 关 (灌 注压力 的重要工具平台。然而，由于大鼠肾静脉壁薄脆弱及输尿管 80cmH：0)，于远心端结扎线前方切开下腔静脉，观察下腔 纤细迂曲的特点，在动物模型构建的过程中静脉吻合和尿路 静脉流出液清亮，双肾色泽变灰白后，贴下腔静脉及腹主动 重建往往成为重点、难点所在 ，时常制约和影响整个实验进 脉分别离断两侧肾动、静脉，保留全长供肾血管。取出供肾 程。为此，我们在长期进行大鼠肾移植动物模型构建的工作 后迅速置4℃生理盐水中冷藏保存。 过程中，对静脉吻合和尿路重建手术方式进行了不断地探索 5．受体左侧原肾切除手术：按供体方法进行麻醉及术 和尝试，并收到了较好的实验效果。 前准备，取腹部正中切 口进入受体大鼠腹腔，牵出腹腔内容 一 、材料与方法 物以盐水纱布包裹，暴露左侧肾脏，结扎离断左侧肾上腺静 I．实验动物：选择8～10周龄清洁级封闭群 sD雄性大 脉及生殖静脉，游离肾周脂肪组织 ，并于肾脏下极水平结扎、 鼠为同系异体肾移植供、受体 (均购 自第三军医大学动物研 离断输尿管；紧贴肾动脉打开肾蒂动静脉鞘，充分游离左肾、 究所)，体重180—210g。均在通风条件下清洁饲养。 动静脉至腹主动脉及下腔静脉开口部位，紧贴腹主动脉及下 2．手术器械：lO倍手术显微镜(镇江光学仪器厂产品)； 腔静脉以两把血管夹分别夹闭左肾动、静脉 ，于近肾门部约 显微手术器械 (上海医疗器械厂产品) 1／3处离断肾动、静脉；取出左侧原肾后 ，迅速以肝素生理盐 3．试剂与药品：1％戊 巴比妥钠注射液；125U／Ⅱd肝素 水冲洗动静脉残端管腔，防止血凝块滞留。 生理盐水(4℃)；无菌生理盐水冰块 ；青霉素钠粉针剂；环孢 6．供肾植人手术(图1～5)：将修整完毕之移植肾脏放 素A口服液。 入受体左侧肾窝，并覆盖冰棉片，根据供受体肾动、静脉管径 4．供肾切取：以0．3％戊 巴比妥钠腹腔注射麻醉动物 及长度情况，进行适当修整 ，使供受体同名血管口径相当，以 (100mg／kg体重)。常规备皮、消毒、铺 巾，大十字切 口进入 利原位端端吻合，并保证吻合后之肾动静脉长度基本一致， 腹腔，游离并牵出腹腔内容物，结扎、离断肠系膜上动脉，充 防止血管吻合后扭曲、成角。两定点法端-端吻合供、受体肾 分暴露腹膜后间隙，自髂血管分支到肝下水平钝性分离腹主 动脉。 动脉、下腔静脉。两侧 肾动静脉鞘打开后充分游离肾动、静