植物甾醇HPLC—ELSD检测方法研究.pdfVIP

维普资讯 2008年9月 中国粮油学报 V01．23．No．5 第23卷第 5期 Journal oftheChineseCerealsandOilsAssociation Sep．2008 植物 甾醇 HPLC—ELSD检测方法研究 胡宝祥 卢 君 沈振陆 莫卫民 孙 楠 (浙江工业大学化学工程与材料学院，杭州 310014) 摘 要 建立了反相高效液相色谱 一蒸发光散射检测器(HPLC—ELSD)测定植物 甾醇含量的方法。结果 表明以甲醇一乙腈(75：25，V：v)为流动相，流速 1．0mL／min，可有效分离混合植物甾醇中的豆甾醇、菜油甾醇 和 I3一谷 甾醇，它们的标准偏差分别为0．0057、0．0056、0．0066；平均回收率分别为98．2％、101．3％、101．8％； 线性范围(线性相关系数)分别为 0．016～0．46rag／mE(r=0．9968)、0．05～O．45mg／mL(r=0．999)、0．022～ O．45mg／mL(r=0．9949)。用该方法成功检测了豆油脱臭馏出物的维生素E提余物中的植物 甾醇。 关键词 反相高效液相色谱 蒸发光散射检测器 植物 甾醇 植物甾醇具有消炎、降血脂、抗溃疡和防治癌症 等生理活性，是当今生产 甾体药物的重要原料。此 外，植物 甾醇也广泛应用于食品、化妆品、饲料、化 工、纺织等其他领域。目前植物 甾醇已成为国际市 场尤其是欧美市场最受关注的功能性食品因子之 H 一 _l1 J 。 植物甾醇主要存在于植物油脂中，它是植 物油脂脱臭时馏出物中的副产物。植物油脱臭馏出 物可作为天然Ⅶ 的来源，经分子蒸馏后获得 VE含 量约为50％的粗产品，再经过离子交换法可获得含 量在 94％以上的VE产品，同时得到大量的天然 vE H 提余物。该提余物中富含植物甾醇，可作为提取植 菜油甾醇 物 甾醇的原料。我国是世界油料生产大国，植物油 法，采用高效液相色谱法分析植物 甾醇时，检测波长 脂资源相当丰富，因此天然VE提余物中植物甾醇的 为210m，易受流动相和样品处理方法等影响[一l0l。 分析测定以及分离精制 目前颇受重视 。 使用 HPLC～ELSD的方法对大豆油脱臭馏出物 大豆油中主要含有豆甾醇、j3一谷甾醇和菜油甾 的维生素E提余物中的甾醇进行分析检测。 醇，因此以大豆油脱臭馏出物为原料获得的天然Ⅶ 提余物中主要含有这三种甾醇。它们具有极其相似 1 试验部分 的基本结构，物理性质差异较小，给分离检测带来一 1．1 主要仪器与试剂 定的困难 。 LUMTECH高效液相色谱仪 (带 自动进样器和紫 自从发现植物 甾醇至今 ，其定量分析一直处于 外检测器)；SEDEX75蒸发光散射检测器；J3一谷甾醇 完善改进之中 J。以往测定总甾醇含量多采用的毛 对照品(』3一谷甾醇含量为77．3％，菜油甾醇含量为 地黄皂苷法已逐渐被淘汰；1UPAC采用酶法，较好的 9．0％)、豆甾醇对照品(含量为95．0％)ACROS公司； 克服了前述方法的缺陷，但操作繁琐、试剂种类繁 大豆油脱臭馏出物的VE提余物：浙江华源制药科技 多，且对甾醇氧化酶制剂本身的纯度和活力有很高 开发有限公司。 的要求l6J。现今多采用气相色谱法或高效液相色谱