蛇毒类凝血酶基因在大肠杆菌中的融合表达及纯化.pdfVIP

维普资讯 第 22卷第 2期 无 锡 轻 工 大 学 学 报 Vo1．22 No．2 2003年 3月 JournalofWuxiUniversityofLightIndustry Mar． 2003 文章编号：1009—038X{2003}02—0022—04 蛇毒类凝血酶基 因在大肠杆菌中的融合表达及纯化 李 民， 杨 青， 包永明， 雷旭宇， 许建强， 安利佳 (大连理工大学 生物工程系，辽宁 大连 116024) 摘 要 ：将大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶 (Gloshedobin)基 因克隆到载体 pET32．a(+)上，在 1_7 c启 动子下以N端融合硫氧还蛋 白的形式在大肠杆菌BL21(DE3)q-进行表达 ，诱导条件为：30℃诱导 6h，IPTG浓度为 1mmol／L．利用固定化金属离子 (Ni )亲和层析分别对胞 内可溶物和变性条件