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树脂柱层析法分离喜树碱 施荣富王瑞芳史作清温珍珍何炳林 南开大学吸附分离功能高分子材料国家重点实验室，高分子化学研究所，天津 30007l 喜树为珙桐科乔术，是我国特有植物，广泛分布于长江以南各地区，资源丰富。喜树中成分 复杂．至今已发现二十余种，包括喜树碱类，喜果甙，鞣花酸类及微量的吲哚碱类等．经过几十年的 大量实践，证明喜树碱(CPT)对胃癌、结肠、。直肠癌、绒毛膜上皮癌、头颈部肿瘤、膀胱癌和白 血病等多种恶性肿瘤都有较好的近期疗效． 提取喜树碱的传统方法是氯仿萃取重结晶法，此法要消耗大量的有机溶剂，生产成本高，溶 剂毒性大，产率低．且提取物中往往包含多种性质、结杜J近似的喜树碱类化合物，若要对组分进行 进一步的分离以获得高纯度的单一组分．用常规的溶剂摹取法难以实现．但用树脂柱层析法进行 分离，有可能解决这一难题．啦附树脂在许多中药有效成分的提取分离中已经取得很好的结果， 可能成为一种推进中药继续发眨的、不可缺少的分离技术，而国内外关于用吸附树脂提纯分离喜 树碱的技术报道很少。因此树h#j包谱分离提纯喜树碱的研究存在很大的必要性和开发潜力． 本组曾就吸附树脂在水体系中对简单有机碱体 系(苯胺、N一甲基苯胺、N，N-二甲基苯胺)的吸附 规律及色谱分离进千亍了考察，并得割了很好的分离 效果(如Fig．1所示)．此实验利川三种胺与ADS一17 物理作用力的差异．采埘梯度洗脱的方法把二者分 开．此结果说明可刚普通颗粒的暇附树脂，以梯度泓 洗常压色谱法米分离结构性能类似的生物碱． 喜树碱(I)在喜树各部位中晌含鲑以累最高，率 组用80％的乙醇水溶液对喜树果进行提取，减压浓缩． o 加40∞ 舶瑚埘140蛐瑚 过滤得橙黄色清夜．HPLC捡测发现，除前面一大的加 V缸) M牛 质峰外．保留时问8min左右有一吸收峰，己确定是喜 Fi91翱疆a匕妇西和li呜蜥喊叫枷l矗E oh助：l∞·8皿 djⅢ酣刚部mj豳加鲫阳)舶0 树碱．保留时间14min左右有一更大的吸收蜂，尚未 F1_m嚏∞栅‘ 确定是何组分．其他绲分的吸收峰均根小． 本组选用了五种树脂进行色谱分离Oms-5，D 柱进行树脂筛选时．提取液上柱币．先用稀的乙醇水溶液把^=量杂质洗下．然后增加乙醇浓度继续 3所示．树脂填料是凝交 淋洗，分部收集．结果发现，1F极性的树脂分离效果较好．如图Fig．2，Fig h．52 型后交联的PST，CP]、一a是前儿组流份的混台液．CPT—b是后几组流份的混合液．由色谱图可看出，保 留时间为14min左右的绵分宽被人鼙淋洗r米，喜树碱只有小部分被洗一F．增加乙醇浓度后，喜树 碱可被完全淋洗干净，而树脂ir直接水洗再利Hj，所以此法不仅操作简便．而且通过梯度淋洗·大 大提高了喜树碱的纯度。 取 厶～ ；小一 CPl曲 3 HPLC of 2 HPhC ofOPT-a Fig profile Fig profile RT=8mitt．Camptothecin；CondiUons：column．C18-5u．159X4，ecnm； min／m1．