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大豆花叶病毒CP基因原核表达与抗血清制备.pdf
生物技术通报
.研究报告. BIOTECHNOLOGYBULLETIN 2009年第10期
大豆花叶病毒CP基因原核表达与抗血清制备
陈文华1 韦传宝1,2 贾玉成1 祁伟1
(1皖西学院化学与生命科学系,六安237012;2安徽省植物生物技术实训中心,六安237012)
S中诱导表迭。通过12%SDS
87.9%一98.9%。将cP基因插入原核表达载体pSBET后在大肠杆茵BL21(DE3)Plys
blot分析对cP具有高度特异
和5%~20%梯度SDS.PAGE两次制备电泳纯化诱导产物,免疫家兔获得抗CP血清,Western
A-Red 800的一抗,可用于田间SMV病样
性。硫酸铵沉淀法与ProteinSepharose亲和层析相结合提取lgG,获得效价迭1:3
检测。
关键词: 大豆花叶病毒CP基因原核表达抗血清制备
ofSMVCPGeneand of
ProkaryoticExpression Preparation
the CP
AntibodyAgainst
ChenWenhualWeiChuanba01·2Jia Weil
Yuchen91Qi
Anhui
Science,Western 237012;
(‘DepartmentofChemut叮andLife University,Liuan
2Plant Centre
BiotechnologyTrainingofAnhuiProvince,Liuan237012)
was to CP CP wa8theninsertedinto and in
SMV expressed
Abstract:Specificprimerdesignedamplify gene.Thegene pSBET
strain.It acidsidentitiesand87.9%一98.9%aminoacidsi-
gscherichiacoli S shared85.O%一96.8%nucleotide
BL21(DE3)plys
intheworld.The was 12%SDSand
dentitieswiththe ofCP isolates by firstly
genes reported objectproteinpurified
sequences
theCPwasraisedinrabbitandits wasconfirmed
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