大白菜胞质雄性不育系RC7及其保持系的细胞学和蕾期基因表达差异分析.pdfVIP

317—1324 西北植物学报，2013，33(7)：1 Acta Bot．Boreal．一Occident．Sin． 3)07—1317-08 文章编号：1000—4025(201 大白菜胞质雄性不育系RC7及其保持系的 细胞学和蕾期基因表达差异分析 赵会芳h2，巩振辉H，赵利民1，柯桂兰1 (1西北农林科技大学园艺学院，陕西杨陵712100；2铜仁职业技术学院农学院，贵州铜仁554300) 摘 要：以大白菜雄性不育材料RC?及其保持系B。为材料，通过对两材料花药发育过程进行细胞学观察，并利用 eDNA—AFI，P技术分析两材料花蕾的基因表达差异，以明确RC，发生雄性败育的时期和方式，为大白菜CMS的分 子机理研究提供依据。结果显示：(1)细胞学观察发现，大白菜雄性不育材料RC，及其保持系B，的小孢子母细胞 减数分裂属同时型，小孢子在四分体中的排列属四面体型，保持系B，花药的绒毡层属于腺质型；不育材料RC，在 四分体时期绒毡层细胞内出现大的液泡，呈现败育征兆，单核期绒毡层解体，中层退化，小孢子核开始解体、败育， 属于单核花粉败育型。(2)对两材料蕾期基因的eDNA—AFI。P差显比较分析表明，共获得了23条阳性差异片段， 其中在不育系RC?花蕾中特异表达的有8条，在保持系B，花蕾中特异表达有10条，两系中共有条带5条。(3)对 不育系中特异表达的8条谱带进行Blast搜索发现，H1与拟南芥光合反应蛋白基因有较高的一致性，H26与拟南 芥钙调磷酸酶类磷酸酯酶家族蛋白质的部分序列存在90％的一致性，属于细胞信号转导基因；对来自保持系的10 条谱带的差异片段功能以及一致性进行比对分类发现，它们包括糖代谢基因、蛋白质的合成与运输基因、乙烯诱导 基因、电子传递和能量途径基因、未知或假定蛋白等。研究表明，大白菜雄性不育材料RC，可能是由于绒毡层细胞 液泡化和径向肥大，小孢子受挤压后破裂降解，不能形成正常的成熟花粉粒而败育；乙烯诱导基因(H29)在保持系 中特异表达，在不育系中沉默，表明不育系中缺乏乙烯相关基因。 关键词：大白菜；小孢子；细胞质雄性不育；cDNA—AFI。P；基因表达 中图分类号：Q942．4；Q786文献标志码：A Differential inFlowerBudsof CMSand ExpressionAnalysis RC7 ItsMaintainerLineofBrassica L． campestris Guilanl Zhenhui卜，ZHAOLiminl，KE ZHA()Huifan91～，GONG (1 ofHorticulture，NorthwestA＆．F of College University，Yangling，Shaanxi712i00，China；2College Poly Agriculture，Tongren technic 55,1300．China) College，Tongren，Guizhou of male 1ine anditsmaintainerlineofChinese RC7 Abstract：Morphologycytoplasmic—genicsterility cabbage were studiedtomakeclear