木瓜籽提取物免疫活性研究.pdfVIP

V01．4 第4卷第12期 亚太传统医药 No。12 2008年12月 Asia—PacificTraditionalMedicine Dec．2008 木瓜籽提取物免疫活性研究 微1 王会堂1，刘淑霞2，冯耀勇1，王储君1，刘 (1．长春理工大学生命科学技术学院，吉林长春130022；2．吉林大学，吉林长春130021) 摘要：目的：通过观察宣木瓜籽提取物中的三萜类化合物对免疫抑制小鼠模型的作用，研究提取物的免疫活性。 方法：采用昆明种小鼠环磷酰胺造(Crx)模法制作免疫抑制小鼠模型。灌胃给药，观察研究木瓜籽提取物中的三 萜类化合物对其腹腔巨噬细胞吞噬功能、溶血素形成及外周血T淋巴细胞数的影响。结果：与对照组相比木瓜籽 提取物可使吞噬百分率、吞噬指数显著升高；提取物中的三萜类化合物可促进溶血素的形成并提高外周血中T淋 巴细胞教。结论：木瓜籽提取物的活性部位对免疫抑制小鼠有免疫兴奋作用。 关键词：木瓜籽提取物；免疫活性；三萜类化合物 中图分类号：R392 文献标识码：A 文章编号：1673—2197(2008)12一0032一02 木瓜籽为蔷薇科植物贴梗海棠(Ch口朋omP如sS户Pci05口 (S讹甜)N口如i)的成熟果实的种子，其中产于安徽省宣城 地区的道地药材，称为宣木瓜。木瓜味酸、温，入肝、脾经。 木瓜果中含有齐墩果酸(DZ阳加Z站口f谢)、3一D乙酸熊果酸器有限公司分析仪器总厂)；梅特勒ABl35一S十万分之一 (3—oncc￡∥“，．soZ站口c以)、桦木酸(6甜“Zi行缸口c谢)和熊果酸天平(德国)；HH一42快速恒温数显水箱(常州国华电器有 (搿瑚纽窿f捌)等三萜类化合物[2]，有抗肿瘤、保肝及抑菌限公司)；其它试剂购于北京化工。 作用，其中齐墩果酸、熊果酸是其主要药理活性成分。本课 1．2方法 题组现已从宣木瓜籽中分离并经过波谱学鉴定出包括有机 1．2．1木瓜籽活性部位对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的 酸类、三萜类、黄酮类等在内的20多种化合物，本实验是通 研究取鼠适应性喂养2d，第3天随机分成4组，每组10 过药理学方法，筛选出木瓜籽中的三萜类化合物，以确定是 只。除空白对照组注射等量的生理盐水外，均腹腔注射环 否具有免疫活性，为这种可药用、食用性植物深入开发成提 供实验依据。 1实验材料与方法 1．1实验材料 2h后腹腔注射40％的鸡红细胞生理盐水混悬液 1．1．1动物昆明种小鼠120只，体重20．O士2．og，雌雄 兼用，由吉林大学动物实验中心提供，鸡红细胞(CRBC)及鼠，用酒精棉球消毒腹部皮肤，腹腔注射Hanl【’s工作液 豚鼠血清由吉林大学动物实验中心提供。 2．5mL，轻揉小鼠腹部，在腹膜上剪1小孔，吸出腹腔液后 1．1．2木瓜籽提取物的制备宣木瓜购自湖北宣城水果 漓少许在载玻片上并推片，稍于后瑞氏染液染色，自来水冲 批发市场，经吉林大学药学院张静敏教授鉴定为宣木瓜 洗，晾干，显微镜下观察，计算小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细 (C妇伽田钾跆s 胞的吞噬百分率和吞噬指数，其中吞噬百分率(％)一(吞噬 5pPcio船(S伽￡)N口ki)。去果肉，取木瓜籽 1kg用75％的乙醇加热回流提取3次，每次2h，过滤，合并鸡红细胞的吞噬细胞数／100个巨噬细胞)×100％f吞噬指 滤液，除去乙醇用水分散后用氯仿萃取。取氯仿层溶液，挥 数一100个巨噬细胞所吞噬的鸡红细胞数／100。 F氯仿，稠膏于一o．08MPa、50℃减压干燥，即得。 1．2．2木瓜籽活性部位对小鼠溶血素形成的影响研究 1．1．3仪器和试荆注射用环磷酰胺(CTX)，通化茂祥制取鼠适应性喂养2d，第3天随机分成4组，