永生化人食管鳞状上皮细胞系的建立及其染色体不稳定性的研究.pdfVIP

永生化人食管鳞状上皮细胞系的建立及其 染色体不稳定性的研究 张 浩，蔡昌枰，王士礼，陈学明，叶燕芬 (上海交通大学医学院附属瑞金医院，上海200025) 摘要：『目的]建立永生化人食管鳞状上皮细胞系，并研究细胞永生化过程中以及食管肿瘤细胞 染色体的不稳定性。[方法]用人乳头状瘤病毒16型E6厄7(HPVl6E6／E7)转染正常人食管鳞状上 皮细胞，连续传代培养。检测HPVl6E6／E7基因的整合情况及其表达，并对不同代次永生化细胞及 E6， 食管肿瘤细胞进行端粒荧光原位杂交(FISH)检测和分裂后期细胞形态分析。[结果]HPVl6 E7基因转染至人食管鳞状上皮细胞后，增殖旺盛，已传至第75代。在细胞危机期(第13和第17 代)．TYAGGG端粒缺失数为6．0±1．2和4．75：1．5(缺失率分别为6．7％和5．3％)，细胞间桥的出现率为 28．O％～30．9％。细胞永生化以后(第47代)。端粒缺失数减至2．6±O．7(缺失率3％)，细胞问桥出现率 降至3．6％，与危机期的比较差异有统计学意义。而与肿瘤细胞的分裂异常相一致。在细胞永生化过 E6／E7基因可以导致人食管鳞 程中，细胞间桥的出现率与端粒的缺失率呈正相关性。[结论]HPVl6 状上皮细胞永生化，在此过程中存在较多端粒缺失和细胞问桥，表明染色体的不稳定性在细胞永生 化和恶性转变过程中起到重要作用。 主题词：上皮细胞；染色体；肿瘤，实验性；食管肿瘤 中图分类号：R73．35文献标识码：A 文章编号：1671—170X(2008)04—0245—06 EstablishmentofImmortalizedHuman Cell EsophagealSquamous LineandItsChromosomal Instability ZHANG a1． Hao，CAI Shi—li，et Chang-ping，WANG (RuijinHospital,SchoolofMedicine，5矗铆西孟．7i∞细昭University,S如，l劝庙200025，Chin,,) establishimmortalized celllineandto the Abstract：『Purpose]To esophagealsquamousepithelial study chromosomalinvolvedinthe of E6愿7wastrans， instability processimmortalization．[Methods]HPVl6 fectedinto cells subcultured．Theand ofE6andE7 esophagealepithelialand expressionintegration wasidentified．Chromosomalwas telomericFISH．Mitoticcell gene instabilityinvestigatedby morphology was thecell E6／E7transfeeted cellline analysedduring immortalization．[Results]HPVl6esophageal was tothe