沉淀—溶解可调节酶载体的合成及表征.pdfVIP

维普资讯 Vo1．13 高分子材料科学与工程 N0．2 997年 3月 POLYMERICMATERIALSSCIENCEANDENGINEERING Mar 1997 沉淀一溶解可调节酶载体的合成及表征 三 三 钒一 李学耕 宋国强 张 灏 (江苏,5／恼1tT学院应用1t学最，常 ．2l30l6) 0 ‘ 摘 要 ’ 2 制奋了一系列(TP基)丙烯酸砧羹共聚物，利用各单佧的不同亲水性．碍到了系列沉淀一溶许可 调节固定化酶戴 ，其沉淀一溶胖临界pH值有偏酸性、近中性甚至偏碱性。研完了不同的畦与酯及 对 关键词沉淀一溶解。固定化一c甲基)丙…徭酸．(甲基)丙烯酸堕酯一载载体体。目I违 ，，铱批d的 酶是一种高效的生物催化剂，为了使酶能重复利用和增强其稳定性，已有很多关于将其固 定在不溶性载体上的研究报导…。由于此类固定化酶在反应介质中不溶，所以酶促反应是典型 的非均相反应．底物及产物在载体中存在扩散问题．尤其是当此类反应涉及不溶性反应物或不 溶性底物时，几乎不能使用。近年来，利用一些溶解性对环境因素如pH值等敏感的载悼．得到 了沉淀一溶解可调节的固定化酶 ，使这一状况有所改善，但对此类溶解性可调节的酶载悼尚 未开展系统的研究。 (甲基)丙烯酸酯类聚合物是最为常用的、高效的固定化酶载体之一。笔者利用(甲基)丙烯 酸及其酯的不同亲水性，制备了一系列沉淀一溶解可调节的固定化酶载悼。 l 实验部分 1．1 固定化酶载体的制备 ：除去阻聚剂的(甲基)丙烯酸酯与(甲基)丙烯酸按一定比例投入反应器中． A1BN为 引发剂·甲苯为反应介质．在90℃左右进行共聚台反应。大部分共聚物可经抽滤、洗涤得到．有 些则需用石油醚沉淀、洗涤得到。 1．2 共聚物中酸含量的测定 准确称取一定量的烘干共聚物，加入过量的标准NaOH溶液进行碱溶．随后以酚酞为指示 剂．用标准盐酸溶液回滴，经计算得共聚物的酸含量。 1．3 共聚物沉淀一溶解临界pH值的测定 取约0-lg共聚物溶于少量0．05mol／L左右的NaOH溶液中，经电磁搅拌至完全溶解，髓 收}肓日朝：l 5一O7—3l{修改犒怩到 日期；l995一l2一D8 维普资讯 第2期 王 忱等t 淀一藩解可调节酶裁体的台成盈丧正 后边搅拌边滴加 0．05mol／L左右的稀盐酸至溶液完全浑浊，且放置超过 l0rain后不变澄清． 测得此时的沉淀pH值。再滴加稀NaOH溶液．同时搅拌至溶液完全澄清．且放置一段时间后不 出现浑浊．此时测出的pH位为溶解pH值。反复多次取平均值。 2 结果与讨论 2．1 共聚物的表征 对台成得到的共聚物进行了酸含量的测定，并考察丁其沉淀一溶解可调节性。Tab．1给出 了部分二元共聚物的组成及其沉淀一溶解的临界pH值，它不是一点．而是有1个区问．共聚物 的临界pH值从偏酸性．近中性甚至偏碱性都有 对于大多数酶而言，希望载体沉淀一溶解的临 界pH值接近中性．因而该系列载体具有一定的普适性。(甲基)丙烯酸酯共聚物之所以在不同 pH值_下溶解性不同．是由于酸单体单元在不同pH值下有不同的解离状态。在pH值较高时． 酸单元大多数以离子状态(一CO0 )存在，高分子链由于其上酸恨离子所带负电荷的斥力作 用．彼此分离．在溶于水的酸单元的作用下，整个聚台物溶于水溶液中 反之．当pH值降低时， 共聚物上的酸单元大部分以非离子状态(一cooH)存在，酸单元溶于水的趋势减弱．同时高分 子链问的斥力碱小，导致共聚物的沉淀。 Tab．1 Thecharacterization binarycopolylncra aM．vIA：methylmethacrylate．BMA，butylmetha